EB病毒（EBV）感染被認(rèn)為是多發(fā)性硬化癥（MS）發(fā)病的必要條件。此前研究發(fā)現(xiàn)，MS患者體內(nèi)針對EBV核抗原1（EBNA1）的抗體，會“誤認(rèn)”并攻擊大腦中的一種自身蛋白：anoctamin-2（ANO2），提示EBV可能通過這種“交叉反應(yīng)”觸發(fā)自身免疫攻擊。

基于此，2026年1月13日，卡羅林斯卡大學(xué)醫(yī)院分子醫(yī)學(xué)中心Tomas Olsson研究團(tuán)隊(duì)在Cell雜志發(fā)表了“Anoctamin-2-specific T cells link Epstein-Barr virus to multiple sclerosis”揭示了特異性識別Anoctamin-2的T細(xì)胞將EB病毒與多發(fā)性硬化癥聯(lián)系起來。

作者發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性硬化（MS）患者體內(nèi)更常見能特異性識別腦內(nèi)自身抗原ANO2的CD4? T細(xì)胞。在小鼠實(shí)驗(yàn)中，用EB病毒抗原EBNA1或ANO2免疫均可誘導(dǎo)產(chǎn)生交叉反應(yīng)性的CD4? T細(xì)胞和抗體；預(yù)先用ANO2免疫還會加重實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）且該效應(yīng)由CD4? T細(xì)胞介導(dǎo)，并可通過過繼轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)證實(shí)。更重要的是，研究者從接受那他珠單抗治療的MS患者體內(nèi)成功分離出同時(shí)識別EBNA1和ANO2的T細(xì)胞克隆，其T細(xì)胞受體（TCR）序列高度重疊。這些結(jié)果首次提供了直接機(jī)制證據(jù)：EBV感染引發(fā)的抗EBNA1免疫反應(yīng)可交叉攻擊中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的ANO2，從而將EB病毒感染與MS相關(guān)的神經(jīng)炎癥聯(lián)系起來。

圖一 ANO2 是多發(fā)性硬化癥中 T 細(xì)胞應(yīng)答的靶點(diǎn)

研究人員通過高靈敏度的FluoroSpot技術(shù)，檢測多發(fā)性硬化癥（MS）患者血液中T細(xì)胞對ANO2（一種腦內(nèi)自身抗原）的反應(yīng)。

結(jié)果顯示：超過一半（56.7%），遠(yuǎn)高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者或健康人；接受那他珠單抗治療的MS患者（MS-Nat）則表現(xiàn)出更強(qiáng)的IL-17A和IL-22反應(yīng)，提示Th17型炎癥參與；ROC分析證實(shí)，ANO2特異性T細(xì)胞反應(yīng)可有效區(qū)分MS患者與對照組（AUC最高達(dá)0.85）；T細(xì)胞不僅識別ANO2的同源片段（ANO2??–???），還對ANO2全長蛋白的多個區(qū)域（如1–275、409–525等）均有反應(yīng)；同時(shí)，MS患者對EB病毒抗原EBNA1的T細(xì)胞反應(yīng)也顯著升高，且ANO2與EBNA1的反應(yīng)在個體水平上高度相關(guān)，但與巨細(xì)胞病毒（CMV）無關(guān)；阻斷實(shí)驗(yàn)表明，這些反應(yīng)涉及CD4?和CD8? T細(xì)胞；流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證：MS患者體內(nèi)確實(shí)存在更多能分泌IFNγ的ANO2特異性CD4? T細(xì)胞。

簡言之：MS患者普遍攜帶能識別ANO2和EBNA1的致病性T細(xì)胞，二者反應(yīng)高度關(guān)聯(lián)，為“EB病毒感染通過分子模擬觸發(fā)MS”提供了關(guān)鍵人體證據(jù)。

圖二 ANO2預(yù)免疫加重EAE并引發(fā)抗EBNA1的交叉免疫反應(yīng)

研究發(fā)現(xiàn)，EB病毒抗原EBNA1與MS相關(guān)自身抗原ANO2之間存在免疫交叉反應(yīng)。在易感小鼠（如SJL/J和NOD）中，用EBNA1或ANO2蛋白免疫均可誘導(dǎo)產(chǎn)生交叉反應(yīng)性的CD4? T細(xì)胞即識別一種抗原的T細(xì)胞也能響應(yīng)另一種。

進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)顯示：單獨(dú)用ANO2免疫不會引發(fā)EAE，但若先用ANO2預(yù)免疫、再用致病性PLP誘導(dǎo)EAE，疾病明顯加重：發(fā)作更早、癥狀更重、復(fù)發(fā)更多；這種加重與脊髓中致病性Th17細(xì)胞和炎癥細(xì)胞浸潤增加密切相關(guān)，而與抗體水平無關(guān)，說明是T細(xì)胞驅(qū)動的；只有全長蛋白免疫能誘導(dǎo)交叉反應(yīng)性抗體和更廣泛的T細(xì)胞應(yīng)答，肽段效果較弱；最強(qiáng)致病效應(yīng)出現(xiàn)在ANO2全長蛋白預(yù)免疫組，因其激活了更廣譜的自身反應(yīng)性T細(xì)胞。

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總之，EBV感染可能通過誘導(dǎo)交叉反應(yīng)性CD4? T細(xì)胞，使原本針對病毒的免疫反應(yīng)“誤傷”中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而加劇多發(fā)性硬化樣疾病。這為“EBV是MS關(guān)鍵誘因”提供了直接實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

圖三 ANO2特異性T細(xì)胞加劇神經(jīng)炎癥但不單獨(dú)致病

作者通過過繼轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)證明：將識別ANO2的T細(xì)胞與致腦炎的PLP特異性T細(xì)胞一同注入小鼠，會顯著加重EAE；而對照病毒（HCMV）特異性T細(xì)胞則無此效應(yīng)。

進(jìn)一步用GFP標(biāo)記的MOG和ANO2特異性T細(xì)胞進(jìn)行追蹤發(fā)現(xiàn)：單獨(dú)轉(zhuǎn)移ANO2 T細(xì)胞不會致病，也不引起血腦屏障破壞；但當(dāng)與MOG T細(xì)胞共轉(zhuǎn)移時(shí)，ANO2 T細(xì)胞會遷移到小腦和頸髓，這些區(qū)域恰好有ANO2表達(dá)和血漿滲漏；時(shí)，血腦屏障損傷和炎癥浸潤明顯加劇。

這說明：ANO2特異性T細(xì)胞本身不直接致病，但在已有神經(jīng)炎癥背景下，能被招募到特定腦區(qū)并放大損傷，凸顯其在多發(fā)性硬化進(jìn)展中的“幫兇”作用。

圖四 EBV與自身抗原交叉反應(yīng)性T細(xì)胞驅(qū)動多發(fā)性硬化

研究人員對27,000多個抗原特異性CD4? T細(xì)胞進(jìn)行了基因表達(dá)和T細(xì)胞受體（TCR）的聯(lián)合分析，發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞可分為七種功能類型：活化型、慢性細(xì)胞毒性型、細(xì)胞毒性型、炎癥型、代謝型、非活化型和增殖型。

其中，識別EB病毒抗原EBNA1、自身抗原ANO2或CRYAB的T細(xì)胞，主要集中在活化型和細(xì)胞毒性型，它們高表達(dá)與遷移入腦（如CCR6、CXCR3）、殺傷神經(jīng)細(xì)胞（如顆粒酶、穿孔素）和促炎反應(yīng)（如IFNγ、IL-17）相關(guān)的基因，顯示出明顯的致病潛力。特別是EBNA1/ANO2交叉反應(yīng)性T細(xì)胞，在多個致病亞群中均有分布，提示它們可能“認(rèn)錯目標(biāo)”，把病毒抗原和腦內(nèi)自身蛋白當(dāng)成同一個敵人進(jìn)行攻擊。

相比之下，非特異性刺激（如抗CD3）誘導(dǎo)的T細(xì)胞多處于非活化狀態(tài)，而ABD刺激則主要激活增殖和代謝活躍的細(xì)胞。

值得注意的是，慢性細(xì)胞毒性型T細(xì)胞幾乎全部來自EBNA1刺激且富集IFNγ相關(guān)通路，進(jìn)一步強(qiáng)化了EBV在MS發(fā)病中的關(guān)鍵角色。

總之，多發(fā)性硬化患者體內(nèi)針對EBNA1和ANO2的T細(xì)胞不僅存在交叉反應(yīng)，還具備活化、遷移入腦和直接殺傷的能力，為“EBV觸發(fā)MS”提供了強(qiáng)有力的免疫學(xué)證據(jù)，也為未來靶向這些致病T細(xì)胞的診斷和治療策略指明了方向。

圖五 全文摘要圖

總結(jié)

研究發(fā)現(xiàn)，MS患者體內(nèi)針對ANO2的T細(xì)胞主要是能分泌IFNγ、IL-17A等炎癥因子的CD4? T細(xì)胞，具有典型的致病性Th1/Th17特征。這些細(xì)胞不僅處于活化狀態(tài)，還表達(dá)CXCR3、CCR6等“導(dǎo)航分子”可幫助它們進(jìn)入大腦并攜帶顆粒酶等毒性分子，直接損傷神經(jīng)組織。超過一半的MS患者存在這種ANO2反應(yīng)性T細(xì)胞，提示其可作為治療靶點(diǎn)，比如清除這些細(xì)胞或誘導(dǎo)免疫耐受。更值得注意的是，ANO2抗體可在MS發(fā)病前5–10年就出現(xiàn)且與神經(jīng)損傷標(biāo)志物sNFL升高相關(guān)，有望成為預(yù)測疾病風(fēng)險(xiǎn)和評估嚴(yán)重程度的早期生物標(biāo)志物。

文章來源

https://doi.org/10.1016/j.cell.2025.12.032

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