近日，東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院脊柱外科中心王運濤教授團隊在國際權(quán)威期刊《Cellular & Molecular Biology Letters》（IF=10.2，中科院一區(qū)）發(fā)表題為“Macrophage-derived legumain ameliorates excessive mechanical stress-induced ferroptosis of nucleus pulposus cells and intervertebral disc degeneration via integrin avβ3-Hippo signaling”的研究論文。該研究首次揭示了巨噬細(xì)胞來源的Legumain（LGMN）蛋白作為關(guān)鍵的力學(xué)感應(yīng)分子，通過靶向髓核細(xì)胞整合素αvβ3并激活Hippo信號通路，從而抑制機械應(yīng)力誘導(dǎo)的鐵死亡，發(fā)揮內(nèi)源性保護(hù)作用，為椎間盤退變的防治提供了全新的干預(yù)靶點。王運濤教授為通訊作者，2023級博士生汪沛漾為第一作者。該工作得到國家自然科學(xué)基金及江蘇省高水平醫(yī)院建設(shè)項目的資助。

腰痛是全球范圍內(nèi)致殘的主要原因，預(yù)計到2050年患者人數(shù)將超過8億。椎間盤退變是導(dǎo)致腰痛的核心病理基礎(chǔ)，而過度的機械應(yīng)力是其最重要的非遺傳性誘因。盡管巨噬細(xì)胞在椎間盤退變中的炎癥作用已被廣泛認(rèn)識，但其作為力學(xué)感受器、能否在機械應(yīng)力下啟動內(nèi)源性保護(hù)程序，目前尚不明確。

LGMN調(diào)控髓核細(xì)胞鐵死亡的分子機制

研究團隊首先通過單細(xì)胞測序分析人類椎間盤樣本，發(fā)現(xiàn)LGMN在CD68?巨噬細(xì)胞中特異性高表達(dá)，且與退變程度密切相關(guān)。通過構(gòu)建巨噬細(xì)胞特異性LGMN敲除小鼠，研究者發(fā)現(xiàn)敲除LGMN會顯著加劇腰椎不穩(wěn)誘導(dǎo)的椎間盤退變，揭示了LGMN是巨噬細(xì)胞響應(yīng)機械應(yīng)力的關(guān)鍵保護(hù)分子。為模擬體內(nèi)機械應(yīng)力環(huán)境，研究團隊建立了體外髓核細(xì)胞加壓培養(yǎng)模型，證實巨噬細(xì)胞來源的LGMN以劑量依賴方式保護(hù)髓核細(xì)胞免受機械應(yīng)力誘導(dǎo)的退變，該效應(yīng)可被LGMN特異性抑制劑RR-11a阻斷。分子機制方面，LGMN通過其28-291結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合于髓核細(xì)胞表面的整合素αvβ3，進(jìn)而抑制RhoA活性、激活LATS1激酶，促使YAP1磷酸化并滯留于胞質(zhì)，從而下調(diào)促鐵死亡基因（ACSL4、TFRC）的表達(dá)，抑制髓核細(xì)胞鐵死亡。髓核細(xì)胞特異性YAP1過表達(dá)可完全阻斷LGMN的保護(hù)效應(yīng)，證實了Hippo/YAP信號軸的核心作用。上游調(diào)控機制研究顯示，機械應(yīng)力可直接誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞STAT3磷酸化及核轉(zhuǎn)位，進(jìn)而結(jié)合LGMN啟動子促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄，STAT3敲除可阻斷該過程。基于上述發(fā)現(xiàn)，研究團隊開發(fā)了LGMN過表達(dá)小細(xì)胞外囊泡（LGMNOE-sEVs），在大鼠尾椎加壓退變模型中，椎間盤內(nèi)注射LGMNOE-sEVs有效減輕了髓核組織鐵死亡、恢復(fù)了椎間盤高度及基質(zhì)組分，延緩了退變進(jìn)程。該研究闡明了巨噬細(xì)胞來源LGMN作為內(nèi)源性力學(xué)感應(yīng)分子、通過整合素αvβ3-Hippo信號軸抑制髓核細(xì)胞鐵死亡的關(guān)鍵作用，為椎間盤退變的防治提供了新路徑。（編輯 劉敏 校對 王倩 編審 程守勤）