在黏膜免疫穩(wěn)態(tài)的維持以及炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中，三型免疫細(xì)胞（ type 17 immune cells ） 發(fā)揮著至關(guān)重要的作用 。 這一細(xì)胞群體既包括 表達(dá) CD4 的 適應(yīng)性免疫細(xì)胞中的 Th17 細(xì)胞和 RORγt? Treg 細(xì)胞，也包括固有免疫系統(tǒng)中的 ILC3 以及 RORγt? γδT 細(xì)胞。盡管這些細(xì)胞在發(fā)育來源和功能屬性上存在顯著差異，但它們均依賴同一個(gè)核心轉(zhuǎn)錄因子 ——RORγt 來決定其命運(yùn)和功能程序。

保守非編碼序列（ conserved noncoding sequences ，CNS）通常作為順式元件，在調(diào)控基因時(shí)空特異性表達(dá)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。 董晨實(shí)驗(yàn)室 既往研究已對(duì) RORγt 在 Th17 細(xì)胞中的順式調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了較為深入的解析，然而在固有三型免疫細(xì)胞中， RORγt 的順式調(diào)控網(wǎng)絡(luò)仍知之甚少。此外， RORγt 在適應(yīng)性與固有三型免疫細(xì)胞中是否依賴不同的順式調(diào)控機(jī)制實(shí)現(xiàn)差異化表達(dá)，也缺乏系統(tǒng)研究。

2026 年 2 月 26 日，西湖大學(xué) 醫(yī)學(xué)院董晨團(tuán)隊(duì) 在 Science Advances 雜志發(fā)表了題 為

The conserved noncoding sequence CNS11 is a master control region for

Rorc

transcription in type 17 immune cells

在本研究中，研究團(tuán)隊(duì)首先對(duì) Rorc 基因座的保守非編碼序列進(jìn)行了系統(tǒng)分析，并結(jié)合多種 固有免疫細(xì)胞的 ATAC-seq 數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn) CNS11 在 ILC3 中呈現(xiàn)出高度開放的染色質(zhì)狀態(tài)。為直接驗(yàn)證 CNS11 的功能，研究人員構(gòu)建了 CNS11 敲除小鼠模型，并對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)性的表型分析。

令人 驚訝 的是， CNS11 的缺失導(dǎo)致小鼠所有 二級(jí) 淋巴器官完全缺失。進(jìn)一步分析顯示，腸道中 ILC3 細(xì)胞幾乎完全消失；與此同時(shí)， Th17 、 RORγt? Treg 、 RORγt? γδT 細(xì)胞以及 RORγt? 抗原呈遞細(xì)胞（ APC ）也接近完全缺失。這些結(jié)果表明， CNS11 是維持三型免疫細(xì)胞譜系完整性不可或缺的關(guān)鍵順式調(diào)控元件。

盡管 CNS11 對(duì)多種三型免疫細(xì)胞中 RORγt 的表達(dá)均至關(guān)重要，但進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，其發(fā)揮作用的方式卻并不相同。 在 Th17 細(xì)胞中， CNS11 的缺失并不 顯著 影響其初始分化過程；然而在體內(nèi)環(huán)境中， 缺失 CNS 11 的 Th17 細(xì)胞難以長(zhǎng)期維持 RORγt 的穩(wěn)定表達(dá)，最終導(dǎo)致功能逐漸喪失。相比之下， 在 ILC3 的發(fā)育過程中， CNS11 在前體階段即保持高度開放狀態(tài)，其缺失會(huì)直接導(dǎo)致 RORγt 無法被有效誘導(dǎo)，從而在命運(yùn)決定的早期階段即阻斷 ILC3 的生成。該結(jié)果揭示， CNS11 在適應(yīng)性免疫細(xì)胞中主要承擔(dān)維持 RORγt 表達(dá)的功能，而在固有三型免疫細(xì)胞中則更偏向于啟動(dòng) RORγt 的表達(dá)程序。

為闡明 CNS11 實(shí)現(xiàn)差異化調(diào)控的分子機(jī)制，研究團(tuán)隊(duì)開展了深入的機(jī)制研究。通過 DNA pull-down 、雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)、 CUT&Tag 以及體內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)突變等多種技術(shù)手段，作者發(fā)現(xiàn) CNS11 是一個(gè)能夠整合多種轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)的調(diào)控平臺(tái)。研究表明， RORγt 本身可直接結(jié)合 CNS11 ，形成正反饋調(diào)控回路，這是所有三型免疫細(xì)胞共同依賴的基礎(chǔ)機(jī)制。在此基礎(chǔ)上，不同細(xì)胞類型通過引入不同的 “ 協(xié)同因子 ” ，賦予 CNS11 細(xì)胞類型特異性的調(diào)控功能：在 ILC3 中， RUNX3 與 RORγt 協(xié)同結(jié)合 CNS11 并控制 其發(fā)育 過程 ；而在 RORγt? γδT 和 RORγt? Treg 細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄因子 c-MAF 是 CNS11 發(fā)揮功能的關(guān)鍵調(diào)控因子。

為進(jìn)一步驗(yàn)證 RUNX3 在 ILC3 發(fā)育中的作用，研究團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了 RUNX3 條件性敲除小鼠模型。研究結(jié)果顯示， RUNX3 的缺失顯著損害 ILC3 的發(fā)育，并導(dǎo)致固有三型免疫細(xì)胞中 RORγt 的表達(dá)水平明顯下降。值得注意的是，研究還發(fā)現(xiàn) RUNX3 缺失同樣顯著影響 RORγt? APC 的發(fā)育和功能，提示 RUNX3 在 固有 三型免疫 細(xì)胞 中具有更為廣泛的調(diào)控作用。

綜上所述，該研究系統(tǒng)論證了CNS11作為Rorc基因核心順式調(diào)控元件的關(guān)鍵作用，揭示了固有與適應(yīng)性免疫細(xì)胞如何通過共享同一順式元件、卻采用不同轉(zhuǎn)錄因子組合，實(shí)現(xiàn)對(duì)同一關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的差異化調(diào)控。這一發(fā)現(xiàn)不僅加深了對(duì)三型免疫細(xì)胞發(fā)育與功能調(diào)控機(jī)制的理解，也為未來差異化靶向不同三型免疫細(xì)胞提供了新的理論依據(jù)和潛在策略。

清華大學(xué) 免疫所 博士生張昊為該論文第一作者，西湖大學(xué) 醫(yī)學(xué)院 董晨教授和 清華大學(xué) 免疫所 王小虎 副 研究員 為本文的通訊作者。

https://www.science.org/doi/epdf/10.1126/sciadv.adz6964

制版人： 十一

學(xué)術(shù)合作組織

（*排名不分先后）

戰(zhàn)略合作伙伴

（*排名不分先后）

轉(zhuǎn)載須知

【非原創(chuàng)文章】本文著作權(quán)歸文章作者所有，歡迎個(gè)人轉(zhuǎn)發(fā)分享，未經(jīng)作者的允許禁止轉(zhuǎn)載，作者擁有所有法定權(quán)利，違者必究。

BioArt

Med

Plants

人才招聘

近期直播推薦

點(diǎn)擊主頁推薦活動(dòng)

關(guān)注更多最新活動(dòng)！