阿片戒斷時(shí)產(chǎn)生的強(qiáng)烈厭惡感，是長(zhǎng)期戒斷的一大障礙。中央杏仁核（CeA）作為處理疼痛、威脅、情緒和身體應(yīng)激反應(yīng)的關(guān)鍵腦區(qū)，在戒斷期間高度活躍。然而，目前對(duì)CeA中特定類型神經(jīng)元在這一過程中的具體作用仍知之甚少。

2025年12月19日，賓夕法尼亞大學(xué)Gregory Corder團(tuán)隊(duì)在Neuropsychopharmacology發(fā)表：Central amygdalar PKCδ neurons mediate fentanyl withdrawal，揭示了中央杏仁核中的PKCδ神經(jīng)元介導(dǎo)芬太尼戒斷反應(yīng)。

本研究聚焦小鼠在芬太尼戒斷期間，中央杏仁核外側(cè)囊部（CeLC）中一類表達(dá)PKCδ蛋白的神經(jīng)元（稱為CeLPKCδ神經(jīng)元）。作者發(fā)現(xiàn)，在戒斷時(shí)，CeA前部一個(gè)特定亞區(qū)的CeLPKCδ神經(jīng)元活動(dòng)顯著增強(qiáng)。這些神經(jīng)元原本就能響應(yīng)疼痛和驚嚇等強(qiáng)烈刺激；而在芬太尼依賴的小鼠中，一旦誘發(fā)戒斷，它們不僅自發(fā)活動(dòng)更強(qiáng)，對(duì)疼痛的反應(yīng)也更劇烈。更重要的是，如果在整個(gè)芬太尼暴露期間持續(xù)抑制這些神經(jīng)元的活性，小鼠的戒斷癥狀會(huì)明顯減輕。此外，團(tuán)隊(duì)還繪制了投射到CeLC、且?guī)в笑?阿片受體的上游腦區(qū)連接圖，找出了可能直接受阿片類藥物調(diào)控的輸入通路?？傊?，CeLPKCδ神經(jīng)元的過度活躍是芬太尼戒斷軀體不適的關(guān)鍵原因，為理解阿片依賴中杏仁核的特定細(xì)胞和環(huán)路機(jī)制提供了新線索。

圖一 芬太尼戒斷會(huì)增加CeLPKCδ神經(jīng)元中的FOS表達(dá)

為了檢驗(yàn)芬太尼戒斷是否增強(qiáng)CeLPKCδ神經(jīng)元的活動(dòng)，作者在雄性和雌性Prkcd-Cre小鼠中通過在家中籠內(nèi)連續(xù)8天提供含芬太尼的飲水（0.02 mg/mL）誘導(dǎo)其產(chǎn)生軀體依賴。對(duì)照組小鼠則飲用普通水。

結(jié)果：

在此方案下，接受芬太尼處理的小鼠每日攝入量為3–5 mg/kg，但在雙瓶選擇實(shí)驗(yàn)中并未表現(xiàn)出對(duì)芬太尼水的偏好。在第8天，小鼠接受皮下注射納曲酮（1 mg/kg）或生理鹽水。納曲酮僅在飲用芬太尼水的小鼠中誘發(fā)典型的戒斷癥狀，而在飲用普通水的小鼠中未出現(xiàn)，證實(shí)了軀體依賴的形成。整體戒斷評(píng)分與個(gè)體小鼠的芬太尼攝入量呈正相關(guān)。在注射后105分鐘取腦并進(jìn)行FOS免疫染色（FOS是神經(jīng)元活動(dòng)的標(biāo)志物），結(jié)果顯示：接受芬太尼飲水并注射納曲酮（即處于戒斷狀態(tài)）的小鼠，其中央杏仁核（CeA）外側(cè)部分（CeLC）的FOS陽性細(xì)胞核顯著增多，明顯高于其他所有實(shí)驗(yàn)組且主要集中在CeLC的囊部（CeC）和外側(cè)亞核（CeL）。值得注意的是，即使在僅飲普通水的小鼠中，納曲酮也能選擇性增加CeLC的FOS表達(dá)，提示該區(qū)域平時(shí)受到內(nèi)源性阿片系統(tǒng)的緊張性抑制。相比之下，CeA內(nèi)側(cè)部分（CeM）的FOS升高較弱，僅略高于生理鹽水對(duì)照組且整體上CeLC的FOS信號(hào)遠(yuǎn)強(qiáng)于CeM。進(jìn)一步通過FOS與PKCδ共染色發(fā)現(xiàn)，戒斷顯著提高了CeLPKCδ神經(jīng)元中FOS的共表達(dá)比例；在普通水組中，納曲酮同樣增強(qiáng)了這種共標(biāo)，表明內(nèi)源性阿片系統(tǒng)對(duì)CeLPKCδ神經(jīng)元存在持續(xù)性調(diào)控。

圖二 在未接觸阿片類藥物的小鼠中，CeLCPKCδ神經(jīng)元對(duì)傷害性厭惡刺激和非傷害性厭惡刺激均有反應(yīng)

基于前期FOS圖譜發(fā)現(xiàn)芬太尼戒斷期間中央杏仁核前部神經(jīng)活動(dòng)顯著增強(qiáng)，作者在自由活動(dòng)的Prkcd-Cre小鼠該區(qū)域表達(dá)鈣指示劑GCaMP6f，并通過光纖光度測(cè)定記錄CeLPKCδ神經(jīng)元對(duì)不同軀體感覺刺激的實(shí)時(shí)反應(yīng)。

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結(jié)果：

無害輕觸引起輕微的Ca2?抑制，而所有厭惡性刺激包括傷害性的針刺、熱水滴以及非傷害但令人不適的氣流噴射均引發(fā)顯著Ca2?升高：針刺和熱水引起的反應(yīng)較快回落（約3秒內(nèi)），氣流噴射則持續(xù)約6秒。在刺激后5秒內(nèi)的峰值z(mì)分?jǐn)?shù)及曲線下面積分析中，厭惡刺激均顯著高于輕觸，其中熱水和氣流效應(yīng)尤為明顯。性別差異方面，熱水僅在雌性中引發(fā)顯著反應(yīng)，而氣流在雌雄中均有效應(yīng)。進(jìn)一步關(guān)聯(lián)行為發(fā)現(xiàn)，Ca2?信號(hào)更緊密反映刺激本身而非后續(xù)逃避動(dòng)作，表明CeLPKCδ神經(jīng)元主要編碼刺激的厭惡屬性，而非具體行為輸出。綜上，在未接觸阿片的小鼠中，CeLPKCδ神經(jīng)元廣泛響應(yīng)各類厭惡刺激（無論是否具傷害性），支持其作為厭惡信息整合中樞的角色。

圖三 CeLCPKCδ神經(jīng)元在芬太尼戒斷期間表現(xiàn)出過度活躍和高度敏感

作者進(jìn)一步研究了CeLPKCδ神經(jīng)元在芬太尼戒斷期間對(duì)厭惡刺激的反應(yīng)變化。

結(jié)果：

通過讓同一批小鼠先后處于阿片未接觸和依賴狀態(tài)并在芬太尼飲水第8天注射納洛酮誘發(fā)戒斷，發(fā)現(xiàn)依賴小鼠表現(xiàn)出顯著更高的戒斷評(píng)分，且其CeLPKCδ神經(jīng)元的Ca2?活動(dòng)在納洛酮注射后迅速、持續(xù)升高，15分鐘內(nèi)始終高于基線；而未接觸阿片的小鼠僅出現(xiàn)短暫抑制并快速恢復(fù)。為評(píng)估芬太尼如何調(diào)節(jié)神經(jīng)元對(duì)刺激的敏感性，作者比較了三種狀態(tài)下的反應(yīng)：基線、急性芬太尼注射后（未依賴）以及戒斷期。結(jié)果顯示，在戒斷期間，小鼠對(duì)傷害性熱水滴的Ca2?反應(yīng)（峰值z(mì)分?jǐn)?shù)和5秒曲線下面積）顯著增強(qiáng)，明顯高于基線和急性芬太尼狀態(tài)，而清水對(duì)照組無此變化；對(duì)于非傷害性但厭惡的氣流噴射，急性芬太尼反而抑制了Ca2?反應(yīng)，戒斷期間則無明顯改變。這些結(jié)果表明，芬太尼戒斷特異性增強(qiáng)了CeLPKCδ神經(jīng)元對(duì)傷害性厭惡刺激的敏感性，而急性阿片暴露可能暫時(shí)降低其對(duì)某些非傷害性厭惡刺激的反應(yīng)。

圖四 持續(xù)抑制CeLCPKCδ神經(jīng)元可預(yù)防芬太尼戒斷反應(yīng)，而不影響痛覺敏感性

接下來，作者評(píng)估了表達(dá)Kir2.1的小鼠是否會(huì)出現(xiàn)自發(fā)性芬太尼戒斷反應(yīng)。值得注意的是，表達(dá)EGFP和表達(dá)Kir2.1的小鼠攝入的芬太尼量相當(dāng)。

結(jié)果：

飲用芬太尼的EGFP表達(dá)小鼠的戒斷評(píng)分顯著高于飲用清水的Kir2.1表達(dá)小鼠。然而，Kir2.1的表達(dá)有效阻止了飲用芬太尼小鼠的戒斷癥狀：其戒斷評(píng)分并未顯著高于清水對(duì)照組，且顯著低于飲用芬太尼的EGFP表達(dá)小鼠。這一模式在震顫/顫抖行為和自主神經(jīng)戒斷癥狀中也有所體現(xiàn)。此外，各組在情感性戒斷癥狀方面無顯著差異。Kir2.1表達(dá)主要減輕的戒斷相關(guān)行為是靜息性震顫和足部震顫。雖然芬太尼戒斷通常會(huì)降低運(yùn)動(dòng)活性，但作者發(fā)現(xiàn)，與飲用清水的Kir2.1表達(dá)小鼠相比，兩個(gè)芬太尼飲用組的小鼠運(yùn)動(dòng)活動(dòng)僅略有增加。這表明，在沒有芬太尼戒斷的情況下，抑制CeLCPKCδ神經(jīng)元可能對(duì)運(yùn)動(dòng)活性具有一定調(diào)節(jié)作用。

綜上所述，阿片類藥物戒斷所帶來的厭惡體驗(yàn)使戒斷變得困難并增加了復(fù)吸的風(fēng)險(xiǎn)。慢性疼痛與阿片使用障礙（OUD）之間高度共病，提示二者可能存在共同的生物學(xué)機(jī)制。作者的研究結(jié)果與“潛伏性痛覺敏化”模型相一致，表明CeLCPKCδ神經(jīng)元的過度活躍可能是其中一種共享機(jī)制。通過揭示參與傷害性感受激活與響應(yīng)的CeLCPKCδ神經(jīng)元在阿片戒斷中的作用?？傮w而言，這些結(jié)果強(qiáng)調(diào)了在CeA內(nèi)開展細(xì)胞類型特異性研究的必要性，這對(duì)于開發(fā)不損害疼痛管理的靶向OUD治療策略至關(guān)重要。

文章來源

https://doi.org/10.1038/s41386-025-02298-7

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