【寫在前面】：本期推薦的是由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合研究所、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科等研究團(tuán)隊合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示四物湯通過調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路改善化療引起的卵巢早衰。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Si-Wu-Tang ameliorates chemotherapy-induced premature ovarian insufficiency by regulating a signaling pathway in endoplasmic reticulum stress

背景

卵巢早衰（POI）是一種臨床難治性生殖系統(tǒng)疾病。我們之前的研究表明，中藥配方四物湯（SWT）可能通過改善卵巢血管生成來改善動物模型中的POI，但其潛在機(jī)制尚不清楚。

目的

探討中藥復(fù)方SWT對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）和POI動物模型的作用機(jī)制。通過研究其機(jī)制，本研究希望揭示中醫(yī)“養(yǎng)血活血”的內(nèi)涵。

方法

應(yīng)用超高效液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）鑒定SWT中的化學(xué)成分。在細(xì)胞實驗部分，使用4-氫過氧環(huán)磷酰胺（4-OOHCY）建立化療誘導(dǎo)的HUVEC損傷模型。檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）和細(xì)胞凋亡水平。應(yīng)用激動劑和抑制劑來闡明SWT對ERS信號通路的調(diào)節(jié)作用。在動物實驗部分，分別使用環(huán)磷酰胺（CY）建立大鼠和小鼠模型。通過監(jiān)測發(fā)情周期，卵巢指數(shù)，組織病理學(xué)切片和性激素水平來評估建模和治療效果。采用多種技術(shù)檢測卵巢組織和局部微血管中的ER和凋亡水平。

結(jié)果

SWT增強(qiáng)HUVEC活力，降低化療誘導(dǎo)的ER，氧化應(yīng)激和凋亡水平。它還保護(hù)了HUVEC的遷移和管形成能力。潛在的機(jī)制涉及SWT下調(diào)由4-OOHCY觸發(fā)的PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信號通路的激活。在POI動物模型中，SWT通過改善ERS和細(xì)胞凋亡來恢復(fù)低體重，性激素水平，卵泡計數(shù)和卵巢血管生成。

結(jié)論

總之，SWT通過調(diào)節(jié)ERS中的PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信號通路來保護(hù)HUVEC和POI動物模型的血管生成免受化療誘導(dǎo)的損傷。

圖文摘要

【前言】

卵巢早衰（POI）是一種以40歲以下女性月經(jīng)不規(guī)律為特征的疾病。主要癥狀包括月經(jīng)過少，血管舒縮不穩(wěn)定，睡眠障礙，外陰陰道萎縮，性交困難和疲勞。最近的一項薈萃分析顯示，全球POI患病率約為3.5%，發(fā)展中國家的女性患病率更高。

目前，POI可用的治療選擇非常有限，主要依靠外源性激素替代療法（HRT）。雖然HRT可以緩解與雌激素缺乏相關(guān)的癥狀，并對低雌激素引起的全身并發(fā)癥提供一定的預(yù)防作用，但它不能恢復(fù)卵巢儲備。

四物湯（SWT）是一種治療婦科疾病的經(jīng)典中藥配方，起源于“仙授理傷續(xù)斷秘方”。經(jīng)過千年的臨床應(yīng)用，SWT是一種成熟的補(bǔ)血、補(bǔ)血和調(diào)節(jié)血液循環(huán)的處方。在臨床研究中，證明改良SWT與Climen聯(lián)合治療POI優(yōu)于單獨使用Climen。此外，另一項臨床試驗顯示，SWT的煎劑和濃縮制劑均能促進(jìn)卵泡發(fā)育不良患者的卵泡發(fā)育。我們之前的研究也證實，SWT通過增強(qiáng)促血管生成因子的分泌來改善POI小鼠的卵巢微環(huán)境，血管發(fā)育和妊娠結(jié)局。為了進(jìn)一步闡明SWT在卵巢血管生成中的保護(hù)機(jī)制，有必要使用4-氫過氧環(huán)磷酰胺（4-OOHCY）建立體外化療模型，4-氫過氧環(huán)磷酰胺是環(huán)磷酰胺（CY）的活化類似物。人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）是研究血管生成和內(nèi)皮屏障功能等基本內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)的廣泛接受和良好表征的模型。該用途已在許多研究中得到廣泛驗證，包括POI，多囊卵巢綜合征，卵巢過度刺激綜合征，子宮內(nèi)膜異位癥，因此我們選擇HUVEC作為離體模型來探索血管生成特性并研究SWT對血管生成的貢獻(xiàn)。隨后，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析以探索潛在的機(jī)制，然后在POI動物模型中進(jìn)一步驗證。

【結(jié)果部分】

1.SWT 的UPLC-Q-TOF/MS分析結(jié)果。

2.在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）中建立化療誘導(dǎo)損傷模型及形態(tài)與功能 SWT 的保存。

3.轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析表明， SWT通過調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的蛋白質(zhì)加工過程，對化療損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）具有保護(hù)作用。

4.SWT 對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡及增殖的影響。

5.SWT 調(diào)節(jié)了ERS及凋亡相關(guān)分子的基因表達(dá)水平。

6.SWT 下調(diào)了PERK/ eIF2α /ATF4/CHOP信號通路。

7.SWT 治療改善了POI大鼠模型的卵巢功能。

8.SWT 治療調(diào)控了POI大鼠ERS及凋亡相關(guān)標(biāo)志物的基因表達(dá)。

9.SWT 治療改善了POI大鼠ERS相關(guān)蛋白水平及卵巢細(xì)胞凋亡。

10.SWT 改善了POI動物模型中與血管內(nèi)皮相關(guān)的血管生成、濾泡發(fā)育及CHOP表達(dá)。

11.組織透明化與成像驗證表明， SWT 治療可改善POI模型小鼠的血管生成及卵泡發(fā)育。

【結(jié)論與討論】

SWT 通過調(diào)控PERK/ eIF2α /ATF4/CHOP信號通路，在抑制化療損傷的同時，保護(hù)了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的增殖與血管生成能力，并減少 HUVEC 凋亡。此外， SWT 能全面恢復(fù)卵巢損傷（POI）大鼠的生理特征，改善卵巢微環(huán)境中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）。本研究為 SWT 作為POI基礎(chǔ)治療方案提供了更多實驗證據(jù)，闡明并豐富了 SWT 在‘滋補(bǔ)血液、活血化瘀’方面的中醫(yī)內(nèi)涵。

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