慢性酒精中毒性腦病造模（chronic alcoholic brain injury model）是長期過量飲酒導(dǎo)致的進行性腦功能障礙，主要表現(xiàn)為認知下降、情緒障礙、運動失調(diào)及神經(jīng)退行性改變，模擬人類長期過量飲酒所導(dǎo)致的腦損傷過程。是研究酒精相關(guān)神經(jīng)損傷、認知障礙和腦萎縮的重要手段。該模型選用對酒精敏感且行為反應(yīng)接近人類的C57BL/6J小鼠，結(jié)合飲酒加灌胃的方式（酒精飲水+每日兩次稀釋白酒灌胃）并在前兩周采用劑量遞增策略以提高耐受性。

實驗步驟

將56°白酒稀釋為5%（v/v）和28%（v/v）兩個濃度。模型組小鼠在飲用含5%（v/v）酒精的水作為唯一水源的基礎(chǔ)上，每日進行28%（v/v）酒精的灌胃給藥。前兩周采用劑量遞增方式，灌胃量從0逐步增加至6 g/kg體重，隨后4周維持該劑量；對照組小鼠飲用不含酒精的水并灌胃等體積的生理鹽水。

完成為期6周的造模后，所有小鼠依次進行Y迷宮、Morris水迷宮、爬桿實驗和平衡木實驗等認知與運動行為學(xué)檢測，各項實驗間間隔1～3天，以確保動物充分休息。

行為評估

Y迷宮實驗

Y迷宮實驗用于評估小鼠的空間工作記憶能力。迷宮由三個長度均為40 cm、寬10 cm、高20 cm的臂組成，三臂以120°夾角從中心區(qū)域向外輻射。實驗時，將小鼠置于中心區(qū)，允許其在8分鐘內(nèi)自由探索三個臂。記錄其進入各臂的總次數(shù)及進入順序?？臻g工作記憶通過“交替百分比”進行評估，而總進入次數(shù)則反映小鼠的自發(fā)活動水平。

Morris水迷宮實驗

Morris水迷宮實驗用于檢測小鼠的空間學(xué)習(xí)與記憶能力。實驗裝置為一直徑125 cm、高75 cm的圓形水池，內(nèi)壁涂黑，注入（23±2）℃的自來水。池中設(shè)一隱藏平臺，直徑9 cm，位于第一象限，距池壁30 cm，平臺表面低于水面0.7 cm。實驗包括1天環(huán)境適應(yīng)、1天可見平臺訓(xùn)練（定位航行訓(xùn)練前期）、連續(xù)5天隱藏平臺訓(xùn)練（定位航行）以及1天平臺移除后的空間探索測試。每天進行3次訓(xùn)練，小鼠從不同象限入水，記錄其在90秒內(nèi)找到平臺的潛伏期，若未找到則引導(dǎo)其上平臺并停留15秒?？臻g探索階段記錄小鼠在60秒內(nèi)的游泳路徑。通過ANY-maze?系統(tǒng)采集數(shù)據(jù)，主要指標(biāo)包括平均逃避潛伏期、游泳速度、穿越平臺位置的次數(shù)、在目標(biāo)象限的停留時間等，綜合評估空間記憶能力。

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平衡木實驗

平衡木實驗用于評估小鼠的運動協(xié)調(diào)與平衡能力。實驗裝置為一根長100 cm、直徑1.8 cm的圓木棒，兩端由60 cm高的支架支撐，保持水平。木棒一端連接一個黑色塑料籠，作為小鼠的終點目標(biāo)。實驗前，對小鼠進行訓(xùn)練，使其從一端爬行至另一端的籠中并停留15秒，每只訓(xùn)練6次。正式測試時，記錄小鼠完整通過平衡木所需的時間，時間越短表明其運動協(xié)調(diào)與平衡能力越強。

爬桿實驗

爬桿實驗用于評估小鼠的肌肉耐力與運動協(xié)調(diào)性。實驗使用一根長50 cm、直徑1.2 cm的圓木棒，固定于45°傾斜角度。將小鼠置于桿頂，引導(dǎo)其在15秒內(nèi)爬至桿底，每只小鼠先進行4次訓(xùn)練。正式測試時，記錄小鼠從桿頂爬到底部所需的時間，作為其運動協(xié)調(diào)和肌肉控制能力的指標(biāo)。爬行時間越短，表明運動功能越好。

步態(tài)分析（Gait Analysis）

運動與協(xié)調(diào)功能評估還可使用足跡法或數(shù)字化步態(tài)系統(tǒng)分析行走模式。

指標(biāo)：步長、步寬、支撐時間等，反映神經(jīng)肌肉功能。

通過行為學(xué)結(jié)合腦組織病理學(xué)評估，模型組小鼠出現(xiàn)體重增長減緩、空間工作記憶與認知功能下降、運動協(xié)調(diào)障礙及海馬神經(jīng)元損傷，與臨床慢性酒精中毒性腦病患者的早期表現(xiàn)高度相似， 提示模型成功。

系統(tǒng)推薦

該模型在表面效度（癥狀相似性）和結(jié)構(gòu)效度（致病過程模擬）方面表現(xiàn)良好，具有操作簡便、成本低、穩(wěn)定性高、周期短等優(yōu)勢。還可根據(jù)需要進行更全面地評估酒精對認知、情緒、運動及獎賞系統(tǒng)的多維度影響，提升模型的表型深度和臨床相關(guān)性。

文獻引用：

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• Holloway KN, Douglas JC, Rafferty TM, Kane CJM, Drew PD. Ethanol Induces Neuroinflammation in a Chronic Plus Binge Mouse Model of Alcohol Use Disorder via TLR4 and MyD88-Dependent Signaling. Cells. 2023 Aug 21;12(16):2109. doi: 10.3390/cells12162109. PMID: 37626919; PMCID: PMC10453365.

• Borgonetti V, Roberts AJ, Bajo M, Galeotti N, Roberto M. Chronic alcohol induced mechanical allodynia by promoting neuroinflammation: A mouse model of alcohol-evoked neuropathic pain. Br J Pharmacol. 2023 Sep;180(18):2377-2392. doi: 10.1111/bph.16091. Epub 2023 May 11. PMID: 37050867; PMCID: PMC10898491.

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