【寫(xiě)在前面】：本期推薦的是由北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門(mén)醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)等研究團(tuán)隊(duì)合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示多組學(xué)結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)揭示琥珀散對(duì)EMs大鼠的作用機(jī)制。

【期刊簡(jiǎn)介】

【題目及作者信息】

Mechanism of action of HuPoSan on EMs rats as revealed by multi-omics combined with network pharmacology

背景

子宮內(nèi)膜異位癥（EM）是一種持續(xù)的炎癥性疾病，其三個(gè)主要癥狀，腫塊、疼痛和不孕，嚴(yán)重影響育齡女性患者。琥珀散（HPS）是一種由多種中草藥組成的制劑，臨床上用于治療EM，結(jié)果呈陽(yáng)性；然而，HPS在EM中療效的潛在機(jī)制尚不清楚。

目的

本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、非靶向代謝組學(xué)和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證來(lái)闡明HPS治療EM的機(jī)制。

方法

建立EMs大鼠模型，評(píng)價(jià)HPS的療效。結(jié)合多組學(xué)的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)被用于預(yù)測(cè)潛在的機(jī)制，并在體內(nèi)得到了驗(yàn)證。進(jìn)行分子對(duì)接以探索HPS主要成分和核心途徑蛋白之間的相互作用。

結(jié)果

HPS降低了EM大鼠異位病變的重量和體積。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與多組學(xué)分析相結(jié)合，一致表明Hippo信號(hào)通路是關(guān)鍵機(jī)制；一致地，HPS在體內(nèi)激活了這一途徑，并逆轉(zhuǎn)了與疾病相關(guān)的異常——限制增殖和血管生成，抑制炎癥介質(zhì)，恢復(fù)凋亡——從而抑制了病變進(jìn)展。

結(jié)論

HPS可能通過(guò)以Hippo信號(hào)通路為中心的調(diào)節(jié)來(lái)限制EM大鼠異位病變的生長(zhǎng)。目前的工作為中醫(yī)藥在大鼠EM治療中的系統(tǒng)應(yīng)用提供了新的視角。它為開(kāi)發(fā)用HPS及其活性成分治療EM的新治療方法提供了基礎(chǔ)。

圖文摘要

【前言】

疼痛、腫塊和不孕是EM的主要臨床癥狀，其定義為子宮體外子宮內(nèi)膜（基質(zhì)和腺細(xì)胞）或子宮內(nèi)膜組織（EM）的活動(dòng)性病變。全球10%的育齡婦女受到影響，每年給世界造成超過(guò)800億美元的損失。激素治療，如聯(lián)合口服避孕藥（COCP）、孕激素（口服、長(zhǎng)效、植入物或?qū)m內(nèi)節(jié)育器）和促性腺激素釋放激素（GnRH）激動(dòng)劑和拮抗劑作為一線(xiàn)療法，可以控制疾病的進(jìn)展，但不能治愈疾病。它們具有特定的副作用（靜脈血栓形成風(fēng)險(xiǎn)，癌癥）。手術(shù)治療不僅不能完全切除病變，而且有嚴(yán)重的并發(fā)癥，術(shù)后復(fù)發(fā)率高達(dá)36%。因此，探索安全有效的EM治療方案至關(guān)重要。

琥珀散HPS是一種經(jīng)典的中藥配方，可以追溯到宋代的“普濟(jì)本事方”。該方在臨床實(shí)踐中已經(jīng)使用了很長(zhǎng)時(shí)間。它可以顯著減輕EM患者的主要臨床癥狀（月經(jīng)腹痛、慢性盆腔疼痛、性交疼痛）和全身狀態(tài)（頭暈、失眠），還可以改善患者的體征（血清CA125水平降低、囊腫縮小），與GnRHa聯(lián)用可以顯著降低囊腫術(shù)后復(fù)發(fā)率。我們小組之前的研究表明，HPS可以改善Th1/Th2免疫失衡，減輕MMP-2、TIMP-2（Ma等人）和炎性因子（TNF-α、IL-6、IL-1）的表現(xiàn)。本研究表明，HPS可能對(duì)免疫炎癥因子產(chǎn)生影響，改善腹腔的免疫微環(huán)境，從而影響異位區(qū)域子宮內(nèi)膜的植入粘附侵襲生長(zhǎng)。

盡管它已經(jīng)看到了一些臨床應(yīng)用，但臨床前機(jī)制研究不僅有助于闡明其關(guān)鍵途徑和分子靶點(diǎn)，而且為優(yōu)化給藥方案和推進(jìn)臨床轉(zhuǎn)化提供了關(guān)鍵證據(jù)。鑒于HPS的治療機(jī)制尚不清楚，闡明HPS治療EM的作用機(jī)制具有重大的研究潛力。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一種針對(duì)多靶點(diǎn)藥物的系統(tǒng)研究工具，由于中藥的多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)和多層次的作用機(jī)制，通過(guò)闡明中藥作用中涉及的生物過(guò)程和途徑，以及檢查與成分和疾病相關(guān)的靶點(diǎn)，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)可用于研究中藥復(fù)方和中藥治療EM的效果。隨著分子生物學(xué)和生物信息學(xué)的發(fā)展，轉(zhuǎn)錄組學(xué)和代謝組學(xué)已成為闡明疾病發(fā)展過(guò)程和藥物作用機(jī)制的重要手段。代謝組學(xué)是研究?jī)?nèi)源性小分子代謝物動(dòng)態(tài)變化的最重要的系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)之一。這項(xiàng)技術(shù)可以幫助我們揭示內(nèi)源性代謝物的整個(gè)格局。轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究生物學(xué)過(guò)程和RNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控，可以幫助預(yù)測(cè)EM的潛在上游機(jī)制，并提供基因表達(dá)改變的全景圖。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和代謝組學(xué)來(lái)闡明HPS在EM大鼠中的作用機(jī)制。

【結(jié)果部分】

1.琥珀散HPS成分鑒定。

2.HPS體內(nèi)改善EM評(píng)價(jià)。

3.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析。

4.轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析。

5.代謝物和差異基因分析。

6.蛋白靶點(diǎn)驗(yàn)證。

7.關(guān)鍵靶點(diǎn)免疫組化。

8.SBP活性成分與STAT3蛋白結(jié)合的分子動(dòng)力學(xué)模擬。

9.分子對(duì)接。

10.機(jī)制示意圖。

【結(jié)論與討論】

這些發(fā)現(xiàn)共同提供了分子和表型證據(jù)，表明 HPS 通過(guò)激活Hippo信號(hào)通路對(duì)EMs產(chǎn)生全面的治療效果，并系統(tǒng)闡明了 HPS 治療EMs的藥理機(jī)制（圖10）：(1) 使用LC-MS分析確定了 HPS 中的活性成分；(2) 大鼠實(shí)驗(yàn)顯示 HPS 可減少EMs大鼠的異位病變；(3) 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和多組學(xué)分析表明， HPS 可能通過(guò)影響Hippo信號(hào)通路減緩EMs病變的生長(zhǎng)，該通路有助于炎癥、細(xì)胞增殖和血管生成；(4) 動(dòng)物研究證實(shí)， HPS 治療激活Hippo信號(hào)通路，導(dǎo)致炎癥、細(xì)胞增殖和血管生成減少，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞凋亡；(5) HPS 中的活性成分（如槲皮素、牡丹素、異鼠李素）與Hippo信號(hào)通路中的靶點(diǎn)強(qiáng)相關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)與先前提出的“EMs惡性循環(huán)假說(shuō)”高度一致，即 (inflammation-proliferation-apoptosis-angiogenesis 失衡相互強(qiáng)化， HPS 通過(guò)Hippo信號(hào)通路在該網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)實(shí)現(xiàn)多靶點(diǎn)干預(yù)。未來(lái)的研究應(yīng)通過(guò)條件基因敲除實(shí)驗(yàn)闡明Hippo信號(hào)通路如何與相關(guān)性狀相連。

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