【寫在前面】：本期推薦的是由云南中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床學(xué)院-云南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院、廣東省人民醫(yī)院（廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）廣東心血管研究所-南方醫(yī)科大學(xué)等研究團隊合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示益氣續(xù)骨合劑通過激活A(yù)KT1-Thr473恢復(fù)骨關(guān)節(jié)炎軟骨代謝穩(wěn)態(tài)。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Yiqi Xugu HeJi Restores Cartilage Metabolic Homeostasis via AKT1-Thr473 Activation in Osteoarthritis

背景

骨關(guān)節(jié)炎（OA）是一種退行性關(guān)節(jié)疾病，其特征是軟骨退化、炎癥和軟骨下骨結(jié)構(gòu)的變化。盡管中醫(yī)藥在治療骨性關(guān)節(jié)炎方面得到了廣泛的應(yīng)用，但其作用機制尚不清楚。

目的

本研究旨在探討經(jīng)典中藥方劑益氣續(xù)骨合劑緩解骨性關(guān)節(jié)炎進展的生物活性成分和治療機制。

方法

建立內(nèi)側(cè)半月板失穩(wěn)（DMM）誘導(dǎo)的OA大鼠模型，以評估YQXGHJ的保護作用。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）鑒定了血清吸收的化合物，而網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接預(yù)測了潛在的靶標(biāo)。在IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞炎癥模型中進行了細胞和分子驗證，包括CCK-8、EdU、流式細胞術(shù)、qPCR、蛋白質(zhì)印跡、免疫熒光和Transwell檢測。使用AKT抑制劑MK2206驗證了關(guān)鍵信號通路。

結(jié)果

YQXGHJ顯著減輕了DMM大鼠的軟骨退化和軟骨下骨硬化。在體外，含YQXGHJ的血清促進軟骨細胞增殖，抑制凋亡，恢復(fù)合成代謝（COL2A1、SOX9）和分解代謝（MMP13、IL-6）標(biāo)志物之間的平衡。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和對接將AKT1定位為中心靶點，KEGG分析強調(diào)PI3K-AKT通路。Western blot和免疫熒光證實YQXGHJ激活了PI3K/AKT信號傳導(dǎo)，并增強了AKT1-T473位點的磷酸化。MK2206對AKT1磷酸化的抑制消除了這些保護作用，證實了通路的特異性。

結(jié)論

YQXGHJ通過激活PI3K/AKT信號通路，特別是增強AKT1-T473磷酸化，重建軟骨代謝平衡，從而緩解OA進展。本研究為YQXGHJ治療OA的臨床應(yīng)用提供了藥理學(xué)和機制基礎(chǔ)。

圖文摘要

【前言】

骨關(guān)節(jié)炎（OA）是一種常見的關(guān)節(jié)疾病，其特征是軟骨退化、合成代謝受損、軟骨下骨重塑、滑膜炎癥和骨贅形成，最終導(dǎo)致疼痛和關(guān)節(jié)活動受限。隨著全球人口老齡化，OA的發(fā)病率也在上升。雖然一線臨床療法，如非甾體抗炎藥（NSAIDs），可以暫時緩解癥狀，但長期使用與胃腸道并發(fā)癥和心血管風(fēng)險有關(guān)。此外，手術(shù)不僅昂貴，而且經(jīng)常導(dǎo)致術(shù)后并發(fā)癥。迫切需要安全、持久的OA治療，通過調(diào)節(jié)軟骨代謝穩(wěn)態(tài)來改變疾病進展。

幾個世紀(jì)以來，中醫(yī)藥（TCM）已被廣泛應(yīng)用于治療骨性關(guān)節(jié)炎（OA）。最近的研究強調(diào)了中醫(yī)藥不僅在骨性關(guān)節(jié)炎中的應(yīng)用越來越多，而且在更廣泛的骨科疾病中的應(yīng)用也越來越多，包括骨缺損和骨折。中藥衍生的草藥提取物，如淫羊藿苷（ICA），顯示出有前景的骨誘導(dǎo)特性，并已有效地整合到納米支架等生物材料中，以增強骨再生和修復(fù)。這些制劑在體外和體內(nèi)表現(xiàn)出改善的機械強度、生物相容性和成骨活性，為骨組織工程和骨折愈合提供了新的治療策略。臨床研究表明，中藥復(fù)方制劑具有顯著的抗炎作用，不良反應(yīng)發(fā)生率相對較低；然而，它們的潛在機制尚未完全闡明。益氣續(xù)骨合劑（YQXGHJ）是一種源自中國西南部（云南）的傳統(tǒng)中成藥，傳統(tǒng)上用于治療包括骨性關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的骨關(guān)節(jié)疾病。我們之前的臨床觀察表明，YQXGHJ顯著促進了踝關(guān)節(jié)骨折患者術(shù)后骨痂的形成�；谶@些發(fā)現(xiàn)，我們假設(shè)YQXGHJ可能通過調(diào)節(jié)軟骨細胞代謝穩(wěn)態(tài)對OA產(chǎn)生治療作用。為了驗證這一假設(shè)，建立了OA大鼠模型，并系統(tǒng)評估了與軟骨基質(zhì)代謝相關(guān)的關(guān)鍵合成代謝和分解代謝標(biāo)志物的表達。此外，液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS/MS）用于鑒定YQXGHJ的生物活性成分。然后使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析這些成分以預(yù)測潛在的治療靶點，隨后進行分子對接以驗證這些活性成分與預(yù)測靶點之間的結(jié)合親和力。

【結(jié)果部分】

1.YQXGHJ在DMM誘導(dǎo)的大鼠OA模型中緩解軟骨下骨硬化并恢復(fù)軟骨代謝平衡。

2.含YQXGHJ的血清在IL-1β誘導(dǎo)的炎癥條件下增強軟骨細胞增殖，抑制凋亡，恢復(fù)代謝平衡。

3.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析表明，PI3K-AKT信號通路是YQXGHJ治療骨關(guān)節(jié)炎的核心通路。

4.YQXGHJ AKT1結(jié)合化合物的分子對接和CETSA驗證。

5.YQXGHJ通過PI3K/AKT信號通路調(diào)節(jié)軟骨細胞代謝。

6.YQXGHJ減弱IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞遷移，并通過AKT信號恢復(fù)代謝標(biāo)志物的表達。

7.YQXGHJ通過體內(nèi)AKT1-Thr473信號調(diào)節(jié)軟骨代謝穩(wěn)態(tài)。

8.YQXGHJ緩解骨關(guān)節(jié)炎的擬議機制示意圖。YQXGHJ激活OA軟骨細胞中的PI3K/AKT信號通路，導(dǎo)致Thr473位點AKT1磷酸化增加。

【結(jié)論與討論】

在這項研究中，我們證明YQXGHJ通過激活A(yù)KT1和調(diào)節(jié)PI3K/AKT信號通路來恢復(fù)骨關(guān)節(jié)炎中的軟骨代謝穩(wěn)態(tài)。YQXGHJ在體外和體內(nèi)均能抑制軟骨降解，促進軟骨細胞增殖，減少凋亡。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接將AKT1確定為關(guān)鍵的治療靶點，隨后的驗證證實了其在介導(dǎo)YQXGHJ作用中的關(guān)鍵作用。

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