前言

相信這正是你我都曾遭遇的困境：論文寫到核心的體內(nèi)機(jī)制部分，面對(duì)那些關(guān)鍵的“How”與“Why”，我們往往只能依靠間接證據(jù)進(jìn)行推論——“組織切片提示”“生化指標(biāo)推測(cè)”“最終表型表明”。

這些措辭，既是我們嚴(yán)謹(jǐn)?shù)捏w現(xiàn)，卻也暴露了證據(jù)鏈中最脆弱的一環(huán)。審稿人敏銳的目光常常在此停留，提出那個(gè)令人輾轉(zhuǎn)反側(cè)的問題：“ 這些體外或終點(diǎn)的數(shù)據(jù)，如何直接證明你所述的動(dòng)態(tài)過程，真實(shí)發(fā)生在活體之中？ ”

傳統(tǒng)研究往往止步于終點(diǎn)分析，無法捕捉生命活動(dòng)的動(dòng)態(tài)軌跡。如今，借助 小動(dòng)物成像系統(tǒng)，研究者無需犧牲動(dòng)物，即可實(shí)現(xiàn)非侵入、實(shí)時(shí)、高靈敏的活體成像。無論是腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移、藥物的分布與代謝，還是基因的表達(dá)與調(diào)控，都能以直觀影像與精準(zhǔn)數(shù)據(jù)，呈現(xiàn)生物過程的真實(shí)動(dòng)態(tài)。

這不僅是一臺(tái)成像設(shè)備，更是一座通往生命微觀世界的“實(shí)時(shí)觀測(cè)站”，助您在科研道路上，看得更清、走得更遠(yuǎn)。

多模態(tài)成像支持

——可進(jìn)行生物發(fā)光、熒光、近紅外一區(qū)成像等多種模式，滿足腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥物代謝等多個(gè)研究方向的需求。

高時(shí)空分辨率

——實(shí)現(xiàn)從全身分布到局部細(xì)節(jié)的清晰成像，支持時(shí)間序列跟蹤，捕捉生命活動(dòng)的動(dòng)態(tài)過程。

定量分析能力

——配備智能分析軟件，可對(duì)信號(hào)強(qiáng)度、分布范圍、代謝動(dòng)態(tài)等進(jìn)行精準(zhǔn)量化，助力數(shù)據(jù)驅(qū)動(dòng)的科學(xué)研究經(jīng)典

活體長期追蹤

—— 同一動(dòng)物可多次成像，減少個(gè)體差異，提升實(shí)驗(yàn)一致性，尤其適合藥效評(píng)價(jià)、疾病進(jìn)展監(jiān)測(cè)等長周期研究。

經(jīng)典研究路徑示例

小動(dòng)物活體影像系統(tǒng)的應(yīng)用

1. 腫瘤學(xué)（發(fā)生發(fā)展、免疫治療、CAR-T療法）

2. 藥物研發(fā)（藥效藥理、藥代動(dòng)力學(xué)、新藥與靶向藥篩選）

3. 心腦血管疾病機(jī)制與治療

4. 干細(xì)胞誘導(dǎo)分化與疾病治療

5. 動(dòng)物模型構(gòu)建（腫瘤、代謝、神經(jīng)等疾病模型）

6. 炎癥與感染性疾病研究

7. 生物材料與納米靶向遞送系統(tǒng)

8. 傳染病機(jī)制與防治

9. 核酸疫苗與基因表達(dá)調(diào)控

10. 骨骼疾病與修復(fù)研究

11. 食品質(zhì)量與安全

An injectable dihydroartemisinin nanocomposite hydrogel for dual-targeting PANoptosis and inflammation to treat osteoarthritis（一種可注射的雙氫青蒿素納米復(fù)合水凝膠用于雙重靶向PANoptosis與炎癥治療骨關(guān)節(jié)炎）《Journal of Nanobiotechnology》（一區(qū)，IF：12.6）

摘要圖：

Fig 5

1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

評(píng)估所構(gòu)建的納米復(fù)合水凝膠系統(tǒng)（DHA?PRO@NMs@TSH）在骨關(guān)節(jié)炎大鼠模型關(guān)節(jié)內(nèi)的滯留時(shí)間，驗(yàn)證其緩釋與長效滯留能力。

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

使用近紅外熒光探針 IR808 標(biāo)記納米復(fù)合系統(tǒng)。

制備三種對(duì)比制劑：

• 游離 IR808

• IR808 標(biāo)記的納米膠束（IR808&DHA?PRO@NMs）

• IR808 標(biāo)記的溫敏水凝膠（IR808&DHA?PRO@NMs@TSH）

將三種制劑分別注射入 MIA 誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)炎大鼠的關(guān)節(jié)腔。

使用 IVIS 小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)，在設(shè)定的時(shí)間點(diǎn)（如注射后不同天數(shù)）進(jìn)行全身或局部關(guān)節(jié)成像，監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度與分布。

3. 關(guān)鍵結(jié)果（對(duì)應(yīng) Fig. 5B）

• 游離 IR808：熒光信號(hào)在約 2 天 后基本消失。

• IR808&DHA?PRO@NMs：熒光信號(hào)可持續(xù)約 3 天。

• IR808&DHA?PRO@NMs@TSH：熒光信號(hào)可持續(xù)約 7 天，表明溫敏水凝膠能顯著延長藥物在關(guān)節(jié)內(nèi)的滯留時(shí)間。

4. 成像系統(tǒng)的價(jià)值

• 非侵入、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)：無需處死動(dòng)物，可在同一動(dòng)物上連續(xù)觀測(cè)熒光信號(hào)變化。

• 定量分析：通過熒光強(qiáng)度量化藥物滯留情況，為制劑優(yōu)化和給藥方案設(shè)計(jì)提供直觀數(shù)據(jù)支持。

• 驗(yàn)證遞送系統(tǒng)的緩釋性能：直接證明“納米膠束 + 溫敏水凝膠”二級(jí)遞送系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)長效關(guān)節(jié)滯留，為后續(xù)藥效實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。
  

Non-superagonist CD28-based dualsignal T cell engager targeting KK-LC-1 enhances antitumor efficacy

(靶向KK-LC-1的非超激動(dòng)劑CD28雙信號(hào)T細(xì)胞接合劑增強(qiáng)抗腫瘤療效)

《Journal for ImmunoTherapy of Cancer》中科院一區(qū)，IF 10.6

Fig 1

1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

驗(yàn)證工程化的靶向蛋白 K1 能否在荷瘤小鼠體內(nèi)特異性識(shí)別并富集于表達(dá)KK-LC-1抗原的腫瘤組織，評(píng)估其作為靶向遞送載體的潛力。

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

• 探針標(biāo)記：將K1蛋白與近紅外熒光染料 Cy7 通過NHS酯化學(xué)法共價(jià)連接，制備Cy7標(biāo)記的K1（K1-Cy7）。

• 動(dòng)物模型：使用穩(wěn)定過表達(dá)KK-LC-1的人胃癌細(xì)胞系 HGC27(oe-KK-LC-1) 構(gòu)建皮下移植瘤模型（BALB/c裸鼠）。

成像對(duì)比：

• 實(shí)驗(yàn)組：尾靜脈注射 Cy7標(biāo)記的K1（100 μg/只）

• 對(duì)照組：尾靜脈注射 Cy7標(biāo)記的同型對(duì)照蛋白（100 μg/只）

成像系統(tǒng)與參數(shù)：

• 設(shè)備：CRI Maestro 活體成像系統(tǒng)；激發(fā)波長：745 nm；發(fā)射波長：800 nm；曝光時(shí)間：300 ms；濾光片：780 nm長通濾光片

• 成像時(shí)間點(diǎn)：注射后 24小時(shí)（允許充分分布與清除背景信號(hào)）。

• 定量分析：先進(jìn)行全身活體熒光成像，觀察熒光在體內(nèi)的整體分布。處死動(dòng)物后，取出腫瘤及各主要臟器進(jìn)行離體熒光成像，定量分析腫瘤組織與正常組織的熒光強(qiáng)度比值。

3. 關(guān)鍵結(jié)果（對(duì)應(yīng) Fig. 1G, H, I）

活體成像顯示特異性腫瘤富集：注射24小時(shí)后，K1-Cy7組在小鼠的腫瘤部位（腹股溝區(qū)）呈現(xiàn)顯著的熒光信號(hào)。作為主要代謝器官的肝臟雖有一定背景熒光，但腫瘤信號(hào)特異性明顯。對(duì)照組（Iso-Cy7）的腫瘤區(qū)域則無顯著熒光信號(hào)。

離體驗(yàn)證與定量：離體成像進(jìn)一步證實(shí)，K1-Cy7組的腫瘤組織熒光強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組（圖1H, I），統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著（p < 0.01）。這直接證明了K1蛋白能主動(dòng)靶向并滯留于KK-LC-1陽性腫瘤。

4. 成像系統(tǒng)的價(jià)值

• 非侵入性驗(yàn)證靶向性：在活體動(dòng)物模型中，直觀、無創(chuàng)地證明了工程化蛋白的腫瘤特異性歸巢能力。

• 為治療策略提供前提依據(jù)：此結(jié)果證實(shí)了K1作為靶向模塊的有效性，為其后續(xù)與免疫效應(yīng)模塊（如CD3 scFv、CD28 DARPin）偶聯(lián)，構(gòu)建雙特異性T細(xì)胞銜接器（KK-LC-1×CD3 和 KK-LC-1×CD28）奠定了關(guān)鍵的靶向遞送基礎(chǔ)。

• 支持后續(xù)藥效學(xué)設(shè)計(jì)：明確了靶向蛋白在體內(nèi)的分布特征，為后續(xù)的治療性分子（T細(xì)胞銜接器）的給藥方案和劑量設(shè)計(jì)提供了參考。

Fig 5

1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

在MKN45胃癌細(xì)胞腹膜轉(zhuǎn)移模型中，利用活體成像技術(shù)，無創(chuàng)、動(dòng)態(tài)、定量地監(jiān)測(cè)不同治療組（包括單藥及聯(lián)合療法）對(duì)腫瘤生長的抑制作用。

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

• 報(bào)告基因標(biāo)記：將MKN45腫瘤細(xì)胞用熒光素酶（Luciferase, LUC）基因進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)，使其能夠在體內(nèi)表達(dá)熒光素酶。

• 模型建立：將5 × 10?個(gè)熒光素酶標(biāo)記的MKN45細(xì)胞注射入BALB/c裸鼠的腹腔，建立腹膜轉(zhuǎn)移模型。

• 治療方案：小鼠被分為不同治療組（如NS對(duì)照組、Non-target×CD3組、KK-LC-1×CD3單藥組、KK-LC-1×CD28單藥組、以及KK-LC-1×CD3 + KK-LC-1×CD28聯(lián)合治療組）。

成像系統(tǒng)與流程：

• 設(shè)備：IVIS Lumina III 活體成像系統(tǒng)

• 原理：腹腔注射D-熒光素底物，腫瘤細(xì)胞內(nèi)的熒光素酶會(huì)催化其發(fā)生生物發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生的光信號(hào)強(qiáng)度與活腫瘤細(xì)胞的數(shù)量成正比。

• 時(shí)間點(diǎn)：在治療過程中的第8天（治療前基線）、第16天和第24天進(jìn)行成像。

• 數(shù)據(jù)分析：通過系統(tǒng)軟件（Living Image）量化整個(gè)腹腔區(qū)域的總熒光信號(hào)強(qiáng)度，作為腫瘤負(fù)荷的指標(biāo)，并繪制腫瘤生長曲線。

3. 關(guān)鍵結(jié)果（對(duì)應(yīng) Fig. 5F, G）

• 成像直觀對(duì)比：Fig. 5F的系列圖像直觀顯示，與對(duì)照組和單藥治療組相比，聯(lián)合治療組（KK-LC-1×CD3 + KK-LC-1×CD28） 小鼠腹腔內(nèi)的生物發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間顯著減弱，表明腫瘤生長被有效抑制。

• 信號(hào)定量分析：Fig. 5G的定量曲線和柱狀圖進(jìn)一步證實(shí)，聯(lián)合治療組的平均熒光信號(hào)在治療后期（第16、24天）顯著低于對(duì)照組和KK-LC-1×CD3單藥組（p < 0.05）。這為聯(lián)合療法具有協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)提供了關(guān)鍵的體內(nèi)定量證據(jù)。

4. 該應(yīng)用的價(jià)值

• 藥效學(xué)評(píng)估的金標(biāo)準(zhǔn)：生物發(fā)光成像成為評(píng)估免疫療法對(duì)彌散性、深部腫瘤（如腹膜轉(zhuǎn)移）療效的核心工具，其優(yōu)勢(shì)是傳統(tǒng)卡尺測(cè)量無法比擬的。

• 實(shí)現(xiàn)縱向研究：允許在同一批動(dòng)物身上連續(xù)、多次監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)變化，減少個(gè)體差異，提高數(shù)據(jù)質(zhì)量和統(tǒng)計(jì)效力。

• 為機(jī)制提供支持：該成像結(jié)果與皮下瘤模型中的腫瘤體積測(cè)量、最終瘤重等數(shù)據(jù)相互印證，共同證明了CD28共刺激信號(hào)（KK-LC-1×CD28）能夠顯著增強(qiáng)CD3靶向治療（KK-LC-1×CD3）的療效。

寧波市中醫(yī)藥研究院小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)

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