撰文丨王聰

編輯丨王多魚(yú)

排版丨水成文

提到近年來(lái)最受關(guān)注的癌癥新療法，CAR-T 細(xì)胞療法無(wú)疑占據(jù) C 位。它通過(guò)提取患者自身的 T 細(xì)胞，在體外進(jìn)行基因工程改造，裝上能識(shí)別癌細(xì)胞的 CAR，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，進(jìn)而精準(zhǔn)殺傷腫瘤。此外，這種原本用于治療癌癥的細(xì)胞療法，還在自身免疫疾病領(lǐng)域展現(xiàn)了強(qiáng)大的治療效果。

然而，這種“活藥物”雖有效，卻存在兩大痛點(diǎn)——

1、制備復(fù)雜且昂貴：需要抽血、體外基因工程改造、擴(kuò)增，過(guò)程長(zhǎng)達(dá)數(shù)周，成本極高。

2、需要清髓預(yù)處理：回輸前需用化療清除患者原有淋巴細(xì)胞，副作用大。

近來(lái)，研究人員提出了

in vivo

2026 年 2 月 3 日 ，西湖實(shí)驗(yàn)室/西湖大學(xué)/昌平實(shí)驗(yàn)室馬麗佳團(tuán)隊(duì)聯(lián)合南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所/昌平實(shí)驗(yàn)室李顏團(tuán)隊(duì)，在Vita 期刊發(fā)表了題為：An AAV variant enables human T cell engineeringin vivo的研究論文，該論文此前已在浪淘沙預(yù)印本平臺(tái)上線。

該研究改造開(kāi)發(fā)了一種新型腺相關(guān)病毒變體——AAV6-M2，其能夠通過(guò)全身給藥高度特異性靶向人類(lèi) T 細(xì)胞。在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）人源化小鼠模型中，單次注射 AAV6-M2-CD19CAR，即可在體內(nèi)高效生成 CAR-T 細(xì)胞，有效地清除了外周血和組織中的 B 細(xì)胞，并伴隨狼瘡病理狀況的改善。

該研究還顯示，AAV6-M2 的全身系統(tǒng)性遞送具有顯著的肝臟脫靶現(xiàn)象，與野生型 AAV 相比，小鼠和食蟹猴肝臟中的病毒基因組殘留降低了兩個(gè)數(shù)量級(jí)，這不僅大幅降低了潛在的肝臟毒性風(fēng)險(xiǎn)，還意味著更多的 AAV 病毒載體沒(méi)有被浪費(fèi)在治療不相關(guān)的肝臟，提高了治療的效費(fèi)比。

這項(xiàng)研究表明了 AAV 介導(dǎo)的 CAR 遞送能夠在體內(nèi)生成功能性人類(lèi) CAR-T 細(xì)胞，并揭示了其對(duì) T 細(xì)胞的選擇性靶向的機(jī)制，突顯了工程化 AAV 載體作為in vivoCAR-T細(xì)胞療法的有前景的平臺(tái)，將 CAR-T 細(xì)胞療法從復(fù)雜的個(gè)性化定制轉(zhuǎn)換為通用的現(xiàn)貨型產(chǎn)品，并將 AAV 的治療領(lǐng)域擴(kuò)展到了遺傳疾病之外的癌癥和自身免疫疾病領(lǐng)域。

從“體外改造”到“體內(nèi)生成”：CAR-T 的范式革命

這項(xiàng)研究的核心突破在于，馬麗佳團(tuán)隊(duì)通過(guò) AI 輔助設(shè)計(jì)構(gòu)建了龐大的 AAV 衣殼蛋白 VP3 突變文庫(kù)，通過(guò)高通量篩選，成功進(jìn)化出了AAV6-M2變體，其能夠高效且特異性靶向感染人類(lèi) T 細(xì)胞，且其能夠?qū)y帶的 CAR 基因?qū)腱o息狀態(tài)的 T 細(xì)胞（體內(nèi)絕大多數(shù) T 細(xì)胞處于此狀態(tài)），無(wú)需預(yù)先激活，這為在體內(nèi)直接生成 CAR-T 細(xì)胞奠定了基礎(chǔ)。

研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步通過(guò)全基因組 CRISPR 篩選、冷凍電鏡和分子對(duì)接技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了 AAV6-M2 的“通關(guān)密碼”是 T 細(xì)胞表面的一種名為CD62L的蛋白，CD62L 通常存在于分化程度較低、更具增殖潛力的 T 細(xì)胞（初始 T 細(xì)胞、中央記憶 T 細(xì)胞）上，這意味著 AAV6-M2 能精準(zhǔn)靶向最具有治療潛力的 T 細(xì)胞亞群。

效果驚人：一針清除 B 細(xì)胞，改善狼瘡癥狀

理論很美好，實(shí)際效果如何？研究團(tuán)隊(duì)在具有人類(lèi)免疫系統(tǒng)的“人源化”小鼠模型上進(jìn)行了測(cè)試——

• 高效生成 CAR-T 細(xì)胞：給小鼠注射 AAV6-M2-CD19CAR（靶向 CD19 抗原，常用于治療 B 細(xì)胞淋巴瘤，以及系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫疾?。┝芎?，在其骨髓中高達(dá) 77.5% 的 CD8+ T 細(xì)胞被成功改造為 CAR-T 細(xì)胞，并在外周血和多個(gè)組織器官（脾、肺、肝）中均檢測(cè)到大量 CAR-T 細(xì)胞。

• 有效清除靶細(xì)胞：這些在體內(nèi)原位生成的 CAR-T 細(xì)胞展現(xiàn)了強(qiáng)大的戰(zhàn)斗力，將小鼠體內(nèi)（包括血液和組織中）的 B 細(xì)胞（表達(dá)CD19）清除殆盡。

• 成功治療自身免疫疾?。焊钊苏駣^的是，在模擬人類(lèi)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE，B 細(xì)胞異常活化導(dǎo)致的自身免疫疾?。┑男∈竽Ｐ椭校瑔未巫⑸?AAV6-M2-CD19CAR 后，不僅清除了致病 B 細(xì)胞，還顯著改善了狼瘡腎炎、肺部炎癥等關(guān)鍵癥狀，血清中的自身抗體水平也大幅下降。

這意味著，這種基于 AAV 的in vivoCAR-T技術(shù)不僅可用于癌癥治療，在自身免疫疾病領(lǐng)域同樣潛力巨大。

安全性突破：成功實(shí)現(xiàn)“肝臟脫靶”

安全性是基因治療的重中之重。傳統(tǒng)的 AAV 病毒載體經(jīng)靜脈注射后，極易在肝臟中富集，可能引發(fā)肝毒性。而 AAV6-M2 的一個(gè)巨大優(yōu)勢(shì)就是顯著降低了肝臟趨向性。

該研究表明，與野生型 AAV6 相比，AAV6-M2 在小鼠和食蟹猴的肝臟中的病毒基因組殘留量降低了兩個(gè)數(shù)量級(jí)！這種卓越的“肝臟脫靶”特性，為其臨床轉(zhuǎn)化的安全性提供了重要保障。這還意味著，更多的 AAV 病毒載體沒(méi)有被浪費(fèi)在治療不相關(guān)的肝臟，提高了治療的效費(fèi)比。

展望未來(lái)：一針注射，治療多種疾病

這項(xiàng)研究的意義非凡，它標(biāo)志著：

1、平臺(tái)創(chuàng)新：首次證明了單次系統(tǒng)性注射單個(gè) AAV 載體即可在體內(nèi)生成持久、功能性的人源 CAR-T 細(xì)胞。此前，F(xiàn)DA 已批準(zhǔn)了多款 AAV 的基因療法上市，這為其快速臨床轉(zhuǎn)化提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

2、領(lǐng)域拓展：將 AAV 介導(dǎo)的基因治療應(yīng)用，從傳統(tǒng)的遺傳疾病領(lǐng)域，成功擴(kuò)展至癌癥和自身免疫疾病等獲得性疾病，打開(kāi)了全新的想象空間。

從耗時(shí)費(fèi)力的個(gè)性化定制，到“一針起效”的通用型基因藥物，AAV6-M2 載體帶來(lái)的

in vivo

論文鏈接：

https://www.vita-journal.com/vita/EN/10.15302/vita.2026.01.0008