大概每個(gè)做外泌體提取的科研人都踩過沉淀法的坑：

• 純度不達(dá)標(biāo)：明明嚴(yán)格按步驟操作，提取物里還是有蛋白、雜質(zhì)，純度不達(dá)標(biāo)；

• 假陽性結(jié)構(gòu)：后續(xù) WB 檢測(cè)條帶模糊、電鏡觀察背景雜亂，甚至出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

• 不同樣本不兼容：不同樣本（組織、血清、植物等）的雜質(zhì)類型天差地別，單純靠通用沉淀試劑，換個(gè)樣本就翻車，根本沒法精準(zhǔn)去除雜質(zhì)……

雖然沉淀法操作簡(jiǎn)單、成本低、還能快速針對(duì)大量樣本完成提取，但很多人忽略了沉淀法的核心是通過試劑改變滲透壓，讓外泌體快速沉降，但這個(gè)過程根本沒法區(qū)分外泌體和蛋白、核酸等雜質(zhì)，因此單純的沉淀試劑純度不會(huì)太好。想要獲得干凈的外泌體，就要從源頭減少雜質(zhì)干擾，針對(duì)不同樣本類型選對(duì)專屬試劑盒，宇玫博生物自主開發(fā)的外泌體提取純化試劑盒，適用于組織、細(xì)胞上清、血清血漿、乳液、尿液以及其他體液等多種樣本，已有七百余篇發(fā)表文章支持，點(diǎn)擊下方即可申請(qǐng)免費(fèi)試用，獲取外泌體提取解決方案 >>

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那到底該怎么確保外泌體的提取質(zhì)量，徹底避開這些坑呢？核心就抓兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，也是宇玫博外泌體提取純化試劑盒的設(shè)計(jì)邏輯：

• 樣本處理：初始樣本雜質(zhì)越少，沉淀得到的外泌體自然越干凈。而不同樣本（組織、血清、植物等）的雜質(zhì)類型天差地別，所以沉淀法去除雜質(zhì)的核心在于針對(duì)性的樣本獲取規(guī)范 + 專屬預(yù)處理流程。

• 后期除菌：除菌和去除大囊泡這兩步常常被很多人忽略，這樣不僅容易出現(xiàn)污染，還會(huì)讓大囊泡混入導(dǎo)致假陽性結(jié)果，常見的 WB 條帶模糊、電鏡背景雜亂，往往和這兩個(gè)因素有關(guān)。

不同樣本，如何確定處理方案？

1

細(xì)胞樣本

細(xì)胞樣本處理的關(guān)鍵在于前期培養(yǎng)，常規(guī)培養(yǎng)基含血清蛋白，易與外泌體共沉淀；樣本雜質(zhì)會(huì)增加后續(xù)提取難度，影響純度。

因此建議采用外泌體專用培養(yǎng)基。在李一星教授和周磊教授團(tuán)隊(duì)共同發(fā)表的文章中，團(tuán)隊(duì)就采用搭配試劑盒專用化學(xué)成分限定培養(yǎng)基（低蛋白含量），所提取的外泌體純度高、得率穩(wěn)定，很好的適配了細(xì)胞共孵育、組學(xué)研究等下游實(shí)驗(yàn)[1]。

2

血液樣本（血清/血漿）

血清/血漿樣本中高豐度雜蛋白、代謝廢物多，雜質(zhì)成分復(fù)雜，通用試劑難以精準(zhǔn)去除。

通過差異化預(yù)處理能夠很好的解決這個(gè)問題，魏從文教授團(tuán)隊(duì)采用 Umibio 血清-血漿外泌體提取純化試劑盒，高效去除血清雜蛋白，提取的外泌體支撐了結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移研究，適配蛋白組學(xué)分析需求[2]。

3

組織樣本（心肌、肝臟等）

這些組織質(zhì)地致密難破碎，易殘留組織碎屑、胞內(nèi)蛋白等雜質(zhì)；無菌控制難度高，易出現(xiàn)污染和假陽性。

因此在處理樣本時(shí)需要先進(jìn)行組織破碎與雜質(zhì)分離，協(xié)和醫(yī)院程敏教授團(tuán)隊(duì)，用 Umibio 組織外泌體提取試劑盒處理小鼠組織樣本，經(jīng)酶解、專用試劑孵育等步驟去除雜質(zhì)，提取的外泌體通過 TEM、NTA 鑒定，在心肌纖維化研究中起到了重要作用[3]。

4

植物樣本

植物樣本細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)堅(jiān)固，且富含色素、多糖、多酚及次生代謝物等多種干擾物質(zhì)，使得囊泡的完整提取與高純度獲取難度加大，而且植物樣本種類較多，不同部位的樣本提取方法也存在差異。

因此在處理時(shí)，針對(duì)不同種類的植物樣本，有效破解細(xì)胞壁并高效去除各類雜質(zhì)是關(guān)鍵，可以選用 Umibio 植物囊泡提取試劑盒對(duì)植物組織進(jìn)行預(yù)處理，不僅針對(duì)果實(shí)、花/葉、根莖、干品植物(花、根莖、種子)、大型真菌等五大類研發(fā)了「專屬」試劑盒，更能通過優(yōu)化的酶解方法與專用純化試劑相結(jié)合，能夠溫和釋放囊泡并深度去除多糖、蛋白等污染物。

除此之外還有細(xì)胞上清、尿液等其他樣本，宇玫博生物自主開發(fā)的外泌體提取純化試劑盒也都有解決方案。

特別值得一提的是，如果研究涉及到深度蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)分析或者想讓電鏡下外泌體形態(tài)更清晰，還可以采用聯(lián)用法進(jìn)行外泌體提取，比如沉淀 + 超離、沉淀 + SEC 等，進(jìn)一步減少微量雜質(zhì)對(duì)高精度實(shí)驗(yàn)的干擾。如果你也有更高的實(shí)驗(yàn)要求，點(diǎn)此申請(qǐng)免費(fèi)試用，把雜質(zhì)多、得率低等問題交給我們吧！

內(nèi)容策劃：鄒禮平

內(nèi)容審核：吳軍

題圖來源：圖蟲創(chuàng)意

參考文獻(xiàn)：

[1]. HLF and PPARαaxis regulates metabolic‐associated fatty liver disease through extracellular vesicles derived from the intestinal microbiota. Imeta. 2025 Apr 07;4(2):e70022.

[2]. GP73-dependent regulation of exosome biogenesis promotes colorectal cancer liver metastasis. Molecular Cancer. 2025 May 26;24(1):151.

[3]. Lung-Derived Small Extracellular Vesicles Containing miR-15a-5p/miR-96-5p Promote Myocardial Fibrosis in Hypertrophic Cardiomyopathy via Targeting SMAD7. small. 2025 July 31:e01610.