湖北洪山實驗室

01實驗室介紹

湖北洪山實驗室于2021年2月由湖北省人民政府正式批復(fù)組建，實驗室聚焦生物育種領(lǐng)域，目前匯聚了包括湖北省內(nèi)7個全國/國家重點實驗室、7個國家自然科學(xué)基金創(chuàng)新研究群體、8位院士在內(nèi)的一批長江學(xué)者、國家杰青、優(yōu)青等優(yōu)秀科技人才。湖北洪山實驗室以奉獻對人類和地球都健康的豐富食物為總體目標，圍繞以主要農(nóng)作物、園藝作物、畜禽、水產(chǎn)、微生物等為研究對象，設(shè)置農(nóng)業(yè)生物種質(zhì)資源保護與創(chuàng)新、農(nóng)業(yè)生物重要性狀的生物學(xué)基礎(chǔ)、農(nóng)業(yè)生物綠色優(yōu)質(zhì)品種培育、農(nóng)業(yè)綠色生產(chǎn)體系、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營養(yǎng)健康五大研究方向。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)

湖北洪山實驗室

02實驗背景

細胞傳代：細胞傳代實驗是細胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵操作，旨在讓細胞持續(xù)生長繁殖，為科研等提供充足細胞來源。當細胞在培養(yǎng)瓶中生長至 80% - 90% 匯合度時，需進行傳代。

03實驗步驟

（細胞傳代圖）圖片來源于網(wǎng)絡(luò)，若有侵權(quán)請聯(lián)系刪除

1.觀察細胞狀態(tài)：在顯微鏡下觀察培養(yǎng)瓶中的細胞，當細胞匯合度達到 80% - 90%，細胞形態(tài)飽滿、生長旺盛，無明顯污染跡象時，適宜進行傳代。

2.準備工作：將實驗所需的器材放入超凈工作臺，用 75% 酒精擦拭消毒。打開超凈工作臺的紫外燈，照射 30 分鐘左右進行滅菌。同時，將培養(yǎng)基、PBS、胰蛋白酶等試劑放入牛頓光學(xué)細胞復(fù)蘇儀中“無水加熱”，設(shè)置37度預(yù)熱。

3.棄除舊培養(yǎng)基：在超凈工作臺內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶蓋，用移液器或移液管小心地吸去培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基，盡量吸凈。

4.洗滌細胞：向培養(yǎng)瓶中加入適量的 PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使 PBS 充分沖洗細胞表面，然后將 PBS 吸出棄去，重復(fù)此步驟 1 - 2 次，以去除細胞表面殘留的血清和代謝廢物。

5.消化細胞：向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰蛋白酶溶液，以剛好覆蓋細胞層為宜。將培養(yǎng)瓶放入 37℃的 CO?培養(yǎng)箱中孵育，消化時間根據(jù)細胞類型而定，一般為 1 - 5 分鐘。期間可在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)，當細胞變圓、細胞間隙增大且部分細胞開始脫落時，表明消化適度。

6.終止消化：迅速向培養(yǎng)瓶中加入適量含血清的完全培養(yǎng)基，以終止胰蛋白酶的消化作用。血清中的蛋白質(zhì)可以與胰蛋白酶結(jié)合，使其失去活性。

7.吹打細胞：用移液器或移液管輕輕吹打細胞層，使細胞充分分散成單個細胞懸液。吹打時應(yīng)注意動作輕柔，避免產(chǎn)生大量氣泡，以免損傷細胞。

8.細胞計數(shù)：取少量細胞懸液，用牛頓光學(xué)細胞計數(shù)儀，計算出細胞濃度及活率，以便確定傳代的細胞數(shù)量和接種密度。

9.分裝細胞：根據(jù)實驗需求和培養(yǎng)容器的大小，用移液器將適量的細胞懸液分裝到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。然后向每個培養(yǎng)容器中加入適量的完全培養(yǎng)基，輕輕搖勻，使細胞均勻分布。

10.培養(yǎng)細胞：將分裝好細胞的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放入 37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度、濕度和氣體環(huán)境能夠為細胞提供適宜的生長條件。

（細胞凍存圖）圖片來源于網(wǎng)絡(luò)，若有侵權(quán)請聯(lián)系刪除

04高效精準的細胞分析解決方案

牛頓光學(xué)Venus全自動高通量細胞計數(shù)儀能通過高精度成像計數(shù)以及卓越的算法來識別與區(qū)分單個細胞以及細胞團簇，與血球計數(shù)板需4至6分鐘完成單個樣品分析相比，Venus全自動高通量細胞計數(shù)儀僅需不到10秒，即可輕松完成對1個樣品的分析，顯著提高了實驗效率。

（湖北洪山實驗室）Venus安裝調(diào)試

牛頓光學(xué)有幸為湖北洪山實驗室的科學(xué)研究奉獻一份力量。牛頓光學(xué)旨在為廣大科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)、更便捷的實驗方案！

05產(chǎn)品速覽

Venus是牛頓光學(xué)推出的一款全自動便攜高通量細胞計數(shù)儀，可以對各類細胞進行高通量明場、臺盼藍計數(shù)。Venus采用一體化設(shè)計，配合EasyFive六位細胞計數(shù)板，可實現(xiàn)一步完成6個樣品、30個視野的準確計數(shù)，時間僅需1分鐘。獨特的便攜式設(shè)計，極大提高了實驗室的空間利用率。