條件性位置厭惡實驗（Conditioned Place Aversion, CPA）是條件性位置偏好（CPP）的反向范式，用于評估動物對厭惡刺激（如疼痛、戒斷反應(yīng)、惡心或電擊）所形成的情境性回避學(xué)習(xí)。該方法廣泛應(yīng)用于研究藥物戒斷、內(nèi)臟不適、疼痛相關(guān)情緒以及抗厭惡/抗焦慮干預(yù)的效果。

CPA基于經(jīng)典條件反射：將某一特定環(huán)境線索（如特定圖案、質(zhì)地的隔室）與非條件性厭惡刺激（Unconditioned Stimulus, US）反復(fù)配對；動物逐漸將該環(huán)境與負(fù)面體驗關(guān)聯(lián)，在后續(xù)自由選擇測試中主動回避該區(qū)域，表現(xiàn)為在配對側(cè)停留時間顯著減少。

Fig1 條件性位置厭惡試驗箱

實驗步驟

1. 前測階段（Pre-test）

小鼠自由探索整個裝置（通常15–30分鐘）；

記錄其在各隔室的基線停留時間，排除先天偏好。

2. 條件化訓(xùn)練階段（Conditioning）

交替日配對設(shè)計（最常用）：

厭惡刺激日：注射/給予厭惡刺激（如鋰鹽、嗎啡戒斷劑、足底電擊等）→ 放入A側(cè)室，限制活動30–45分鐘；

對照日：注射生理鹽水或無處理 → 放入B側(cè)室，同樣限制活動；

重復(fù)2–4個循環(huán)（如2天厭惡 + 2天對照）。

關(guān)鍵：厭惡刺激需在其效應(yīng)高峰期與環(huán)境暴露同步。

3. 后測階段（Test）

動物不接受任何處理，自由探索整個裝置；

記錄在厭惡刺激配對側(cè)的停留時間；

陽性結(jié)果：停留時間顯著短于前測或?qū)φ战M → 表明形成位置厭惡。

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評估參數(shù)

厭惡分?jǐn)?shù) =（對照側(cè)時間-厭惡側(cè)時間）/總時間

Δ停留時間 = 后測厭惡側(cè)時間-前測厭惡側(cè)時間（應(yīng)為負(fù)值）

穿梭次數(shù)：評估一般活動性，排除運(yùn)動抑制干擾

案例簡要解析

Fig2 在充滿水的環(huán)境中進(jìn)行位置條件化可誘導(dǎo)CPA

基線測試（Baseline Test）：小鼠在無處理狀態(tài)下自由探索由兩個隔室組成的裝置，記錄其對兩側(cè)的初始偏好。

條件化訓(xùn)練（Conditioning）：在“水配對日”，小鼠被置于一個原本干燥的隔室中，隨后該隔室逐漸被注水淹沒（實驗2）；而在間隔日，小鼠被放入對側(cè)隔室，該隔室在整個試驗期間保持干燥。此過程重復(fù)3次，建立“水環(huán)境 = 不適”的關(guān)聯(lián)。

位置厭惡測試：完成3次配對后，小鼠再次自由探索整個裝置（此時水配對側(cè)已預(yù)先注滿水），評估其環(huán)境選擇行為。

(b) 位置厭惡評分：

以小鼠在水配對隔室中停留時間的百分比表示。結(jié)果顯示，在30分鐘的完整測試中，小鼠在測試階段顯著減少在注水隔室的停留時間（與基線相比），表明形成了強(qiáng)烈的CPA。

(c) 測試階段的時間動態(tài)分析：

將30分鐘的偏好測試按每5分鐘分段分析，進(jìn)一步揭示小鼠從測試初期即表現(xiàn)出對注水隔室的持續(xù)回避且該回避行為在整個測試期間保持穩(wěn)定。

注意事項

刺激強(qiáng)度需優(yōu)化：過弱無法建立厭惡，過強(qiáng)導(dǎo)致僵直或不動，影響空間選擇。

平衡配對設(shè)計：一半動物將A室與厭惡配對，另一半配對B室，消除環(huán)境偏好偏差。

排除非特異性效應(yīng)：如鋰鹽可能引起低活動性，需結(jié)合曠場實驗驗證是否為真實“回避”而非“不能移動”。

時間窗口敏感：厭惡刺激（如戒斷）需在其主觀不適高峰期進(jìn)行配對。

文獻(xiàn)引用：

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• Goltseker, K., Barak, S. Flood-conditioned place aversion as a novel non-pharmacological aversive learning procedure in mice. Sci Rep 8, 7280 (2018). https://doi.org/10.1038/s41598-018-25568-5
  

• avier Navarro-Zaragoza, E. Martínez-Laorden, F. Javier Teruel-Fernández, Victoria Gómez-Murcia, Alberto Cánovas, María-Victoria Milanés, María-Luisa Laorden, Pilar Almela,

• Naloxone-induced conditioned place aversion score and extinction period are higher in C57BL/6J morphine-dependent mice than in Swiss: Role of HPA axis,Pharmacology Biochemistry and Behavior,Volume 201,2021,173106,ISSN 0091-3057,https://doi.org/10.1016/j.pbb.2021.173106.

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