臺盼藍(lán)活率實驗

01簡介

在細(xì)胞生物學(xué)的探索旅程中，我們時常面臨一個關(guān)鍵問題：如何精確地衡量細(xì)胞的活力？這不僅關(guān)系到實驗數(shù)據(jù)的精確性，更直接影響到研究結(jié)論的可靠性。細(xì)胞計數(shù)儀，作為現(xiàn)代生物實驗室的得力助手，其活率分析功能的準(zhǔn)確性自然成為了科研人員關(guān)注的焦點。

今天，我們就來聚焦一個核心議題——細(xì)胞計數(shù)儀在臺盼藍(lán)模式下的活率計數(shù)準(zhǔn)確性。臺盼藍(lán)染色法，通過這種染色方法，我們可以觀察到活細(xì)胞的胞膜能夠排斥臺盼藍(lán)，保持原色；而死細(xì)胞由于胞膜的完整性受損，通透性增加，導(dǎo)致臺盼藍(lán)滲入細(xì)胞內(nèi)部，將其染成藍(lán)色。因此能夠清晰地區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞。但是，當(dāng)這項技術(shù)與現(xiàn)代細(xì)胞計數(shù)儀結(jié)合時，其結(jié)果是否能夠經(jīng)得起科學(xué)的檢驗？

臺盼藍(lán)染料

我們通過精心設(shè)計的臺盼藍(lán)活率實驗，對這一問題進(jìn)行了深入探究。

02實驗?zāi)康?/strong>

通過配置數(shù)個已知活率(理論活率)的HEK293細(xì)胞樣品,對其進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,并使用細(xì)胞計數(shù)儀測量活率，驗證細(xì)胞計數(shù)儀細(xì)胞活率分析的準(zhǔn)確性。

實驗示例圖

03實驗方案

1、將HEK293細(xì)胞復(fù)蘇后,使用PBS對細(xì)胞進(jìn)行重懸,細(xì)胞狀態(tài)良好,在顯微鏡下觀察細(xì)胞,其活率約為99%；

2、水浴加熱滅活部分細(xì)胞,通過將活細(xì)胞與死細(xì)胞按比例混合,分別得到理論活率為90%的Cell1、70%的Cell2、45%的Cell3;

3. 使用牛頓光學(xué)Venus全自動高通量細(xì)胞計數(shù)儀對三種不同活率的樣品分別分析三次,取平均值。

所用細(xì)胞計數(shù)儀

04結(jié)果展示

左圖：臺盼藍(lán)計數(shù)結(jié)果 右圖：臺盼藍(lán)計數(shù)標(biāo)記結(jié)果

理論活率與儀器測量活率

05結(jié)論

牛頓光學(xué)細(xì)胞計數(shù)儀在高、中高、中活率的計數(shù)結(jié)果和理論值結(jié)果相近,牛頓光學(xué)細(xì)胞計數(shù)儀的臺盼藍(lán)活率計數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確。