慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是全球公共衛(wèi)生領(lǐng)域的一大挑戰(zhàn)，迄今尚無有效的治療性乙肝疫苗獲批上市。高載量的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）可通過多種機制誘導機體產(chǎn)生免疫耐受，成為實現(xiàn)慢性乙肝功能性治愈的主要障礙。傳統(tǒng)的蛋白或多肽疫苗通常依賴樹突狀細胞（DC）對抗原的被動攝取，這種遞送方式難以有效突破HBV介導的免疫耐受；此外，體外構(gòu)建的重組抗原往往無法正確模擬病毒天然表位的空間構(gòu)象；同時，以外源形式引入抗原還可能增加炎癥反應(yīng)的風險。因此，如何設(shè)計一種新型治療藥物或策略，在實現(xiàn)抗原長期、穩(wěn)定清除的同時，有效恢復機體對HBV的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，從而維持功能性治愈狀態(tài)，已成為當前亟待突破的關(guān)鍵科學難題。

針對這一挑戰(zhàn)，廈門大學夏寧邵、羅文新團隊基于前期建立的功能化抗體技術(shù)平臺，成功構(gòu)建了一類基于雙特異性抗體的新型“病毒獵手疫苗”——“特異性HBV抗原捕獲疫苗”（SHARP）。通過對靶向HBsAg和DC的功能結(jié)構(gòu)域進行工程化重構(gòu)，該疫苗被賦予雙重功能：一方面具備針對HBV病毒顆粒的靶向識別與清除能力，另一方面可在捕獲抗原后實現(xiàn)對DC的內(nèi)源性抗原靶向遞送。進一步地，通過偶聯(lián)TLR7/8免疫激動劑，該疫苗可強化病毒抗原的吞噬清除，并有效促進DC活化，最終激活HBV特異性免疫應(yīng)答。數(shù)據(jù)顯示該疫苗能夠顯著降低血清中病毒及抗原載量，并提升DC對病毒抗原的攝取效率。在HBV慢性感染的小鼠模型中，SHARP治療可實現(xiàn)長達161天的病毒抗原清除效果，且可誘導機體產(chǎn)生具有保護作用的HBV中和抗體。研究進一步發(fā)現(xiàn)，SHARP能夠快速刺激體液免疫相關(guān)細胞，包括Tfh細胞、生發(fā)中心B細胞和漿細胞的比例和數(shù)量均上升，在脾臟中誘導活躍的生發(fā)中心的形成；并且在SHARP治療后小鼠生發(fā)中心B細胞和漿細胞中IgG相關(guān)基因的表達上調(diào)，IgA相關(guān)基因的表達下調(diào)，說明SAHRP治療促進了B細胞的類別轉(zhuǎn)化，最終通過分泌IgG型別的抗病毒抗體發(fā)揮長期保護作用。此外，SHARP治療誘導了抗病毒細胞免疫應(yīng)答的恢復，主要表現(xiàn)為HBsAg和HBcAg特異性的CD4+和CD8+T細胞的細胞毒性分子的分泌顯著升高。同時，在對功能性治愈的小鼠進行HBV病毒再攻毒的研究中發(fā)現(xiàn)HBV無法建立慢性感染，且在免疫后到期的小鼠脾臟組織中檢測到顯著升高的記憶B細胞和病毒特異性B細胞以及各種記憶T細胞表型比例和數(shù)量的顯著上調(diào)，說明SHARP治療在慢乙肝小鼠模型中重建了抗病毒免疫記憶，從而實現(xiàn)對病毒感染的長效控制。

綜上所述，本研究提出并構(gòu)建了一種針對慢性HBV感染的創(chuàng)新型“病毒獵手疫苗”策略，兼具降低病毒載量與激活特異性免疫應(yīng)答的雙重功能。該策略基于抗體工程化技術(shù)，設(shè)計出一種可同時靶向HBV抗原和DC的雙特異性抗體分子。通過該抗體介導的DC高效攝取及吞噬作用，實現(xiàn)對病毒顆粒及抗原的持續(xù)清除，顯著降低循環(huán)系統(tǒng)中的病毒載量和抗原水平，從而為啟動機體免疫清除機制創(chuàng)造關(guān)鍵窗口期。這一策略有望重建HBV特異性的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，逆轉(zhuǎn)慢性感染所導致的免疫耐受狀態(tài)，為慢乙肝提供一種具有前景的新治療路徑。

該研究成果以題為“Engineered virus-hunter vaccine overcomes HBV immune tolerance”的研究論文在線發(fā)表于Gut。實驗室陳小青、劉雪、許濤、汪雅琳為該論文共同第一作者。夏寧邵、羅文新、劉雪，藥學院劉超為該論文共同通訊作者。該研究得到創(chuàng)新藥物研發(fā)國家科技重大專項、國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學基金、中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金、廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金、深圳市科技創(chuàng)新委員會項目、傳染病疫苗研發(fā)全國重點實驗室開放課題和翔安實驗室科技項目支持。

來源 傳染病疫苗研發(fā)全國重點實驗室

編輯 老Q