葡萄膜炎是全球范圍內(nèi)重要的致盲性眼病之一，尤其好發(fā)于青壯年?；颊卟粌H表現(xiàn)為眼紅、眼痛、視力下降，還常伴有銀屑病、關(guān)節(jié)炎等全身免疫異常。目前臨床主要依賴糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑控制炎癥，但長(zhǎng)期使用會(huì)引發(fā)免疫力下降等副作用。因此，深入解析葡萄膜炎的發(fā)病機(jī)制，尋找精準(zhǔn)治療靶點(diǎn)，成為眼科領(lǐng)域亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。

近日，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院 、北京市眼科研究所侯勝平教授團(tuán)隊(duì)在Science Advances雜志發(fā)表了題為：Apolipoprotein E drives microglia activation in the development of autoimmune uveitis through up-regulation of peptidyl prolyl isomerase F的研究，揭示載脂蛋白E（APOE）在葡萄膜炎發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵作用，為開(kāi)發(fā)新療法提供了潛在靶點(diǎn)。

視網(wǎng)膜作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，其內(nèi)常駐的免疫細(xì)胞——小膠質(zhì)細(xì)胞，在生理狀態(tài)下負(fù)責(zé)維持組織穩(wěn)態(tài)；而在病理狀態(tài)下，它可能被異常激活，轉(zhuǎn)化為促炎表型，釋放大量炎癥因子，破壞血-視網(wǎng)膜屏障，并招募外周免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，最終加劇炎癥反應(yīng)。此前研究已證實(shí)，清除小膠質(zhì)細(xì)胞可顯著緩解葡萄膜炎，提示其在疾病進(jìn)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

APOE是一種多功能蛋白，既往研究多聚焦于其在脂質(zhì)代謝和阿爾茨海默病中的作用，近年也有研究揭示其與青光眼的密切關(guān)聯(lián)。然而，作為兼具脂質(zhì)代謝、炎癥調(diào)控和線粒體功能等多種功能的關(guān)鍵分子，APOE在葡萄膜炎中的作用尚不明確。依托首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院豐富的臨床資源，侯勝平教授團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)Vogt- Koyanagi -Harada綜合征（VKH，一類(lèi)常見(jiàn)葡萄膜炎）患者外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析，發(fā)現(xiàn)APOE表達(dá)顯著上調(diào)。進(jìn)一步在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）小鼠模型中，通過(guò)單細(xì)胞RNA測(cè)序技術(shù)，也觀察到小膠質(zhì)細(xì)胞中APOE的表達(dá) 提升 。

為驗(yàn)證APOE在葡萄膜炎中的功能，研究團(tuán)隊(duì) 采用 了APOE基因敲除小鼠模型，并利用腺病毒載體 敲降 APOE表達(dá)。結(jié)果顯示，APOE 敲降 顯著降低了葡萄膜炎的嚴(yán)重程度。進(jìn)一 步的Western blot和流式細(xì)胞分析表明，視網(wǎng)膜及小膠質(zhì)細(xì)胞中炎癥因子水平也明顯下降。在體外實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)慢病毒 沉默 小膠質(zhì)細(xì)胞APOE表達(dá)，同樣抑制了其炎癥反應(yīng)。隨后的蛋白質(zhì)組學(xué)分析提示，APOE可能通過(guò)活性氧（ROS）信號(hào)通路發(fā)揮作用，其中關(guān)鍵調(diào)控分子為肽酰脯氨酰異構(gòu)酶F（PPIF）——一種位于線粒體、調(diào)控線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（ mPTP ）的關(guān)鍵蛋白。值得注意的是，團(tuán)隊(duì)在VKH患者PBMCs的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中也檢測(cè)到PPIF的高表達(dá)。后續(xù)功能實(shí)驗(yàn)表明，在 沉默 APO的細(xì)胞中回補(bǔ)PPIF，可恢復(fù)因APOE 功能缺失 而抑制的 iNOS 及ROS水平。此外，通過(guò)Seahorse能量代謝分析發(fā)現(xiàn)，APOE通過(guò)PPIF影響小膠質(zhì)細(xì)胞的ATP耦合效率并促進(jìn)質(zhì)子滲漏，間接調(diào)控ROS生成。這些結(jié)果說(shuō)明，APOE通過(guò)上調(diào)PPIF表達(dá)，影響線粒體功能，促進(jìn)ROS產(chǎn)生，從而激活小膠質(zhì)細(xì)胞，驅(qū)動(dòng)葡萄膜炎進(jìn)展 。

該研究不僅揭示了葡萄膜炎中APOE–PPIF–ROS這一新的免疫調(diào)控軸，也為未來(lái)藥物研發(fā)提供了新方向：針對(duì)APOE/PPIF通路的小分子抑制劑或抗體藥物，有望實(shí)現(xiàn)更精準(zhǔn)的免疫調(diào)控，減少全身副作用 。對(duì)該分子的檢測(cè)也 有助于高風(fēng)險(xiǎn)人群的早期識(shí)別與干預(yù)。

北京同仁醫(yī)院、 北京市眼科研究所 侯勝平教授、雷 峰陽(yáng) 教授 為 通訊作者 ，首都醫(yī)科大學(xué) 附屬北京同仁醫(yī)院博士生 曾書(shū)昊、王亞鯤 為 第一作者 。

原文鏈接：https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.aeb3991

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