脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)IgG 抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

說明書

產(chǎn)品名稱

作/者：深圳市恒昊生物科技有限公司

通用名稱：脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

【包裝規(guī)格】48 人份/盒；96 人份/盒【預(yù)期用途】

供體外定性檢測人血清中的LAM-IgG抗體用。脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)是結(jié)核菌細胞壁重要成分， 具有較強的免疫原性。

【檢驗原理】

本試劑盒采用LAM抗原預(yù)包被板ELISA原理，檢測人血清/血漿中存在的LAM-IgG抗體，并配以酶標記抗人IgG單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng)，在450nm波長測各孔O.D值，O.D 值的大小與待檢抗體含量成正比。生物素系統(tǒng)（biotin-avidinsystem）的穩(wěn)固級聯(lián)放大作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性極大地提高。

【主要組成成分】

由預(yù)包被反應(yīng)板、標本稀釋液、濃縮洗滌液（30X）、酶結(jié)合物、顯色劑A、顯色劑B、終止液、陰性對照、陽性對照組成。

：不同批號試劑不得混用。 【貯存條件及有效期】

2-8℃密封保存，避免凍結(jié)。有效期10個月。開封后應(yīng)在2 個月內(nèi)用完。

【適用儀器】

檢測波長450nm的酶標儀均可使用。【樣本要求】

1、盡量用新鮮標本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存。避免反復(fù)凍融（3次以上）。

2、避免用溶血、混濁或脂血標本。

3、樣本若需運輸，應(yīng)保持2-8℃或凍存狀態(tài)。

4、標本中避免加入抗凝劑或保護劑或防腐劑，以免影響試驗結(jié)果。

【檢驗方法】

1、將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出平衡至室溫（15分鐘），取出預(yù)包被板并拆封。

2、將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水按1:30比例稀釋，混勻后待用。

3、標本稀釋及加樣：將待檢標本用標本稀釋液1：

41 稀釋（標本5ul---標本稀釋液200ul），于反應(yīng)板中加入100ul已稀釋待檢標本。設(shè)陰陽性對照（100ul/孔，不稀釋）各一孔，設(shè)空白對照一孔（加100ul標本稀釋液），輕拍混勻。

4、孵育：37℃溫育30 分鐘。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液連續(xù)洗板3次，每次停留30 秒后甩去孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干。

5、加酶結(jié)合物：每孔2滴（或100ul），混勻后置37℃溫育30 分鐘。同上法洗滌3次并拍干。

6、顯色：每孔加顯色劑A、B 各一滴（或各50ul），輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃溫育10 分鐘。

【檢驗結(jié)果的解釋】

1、 目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，藍色者為陽性，無色者為陰性。

2、酶標儀測定：每孔加終止液一滴（或50ul），混勻后在450nm波長下以空白孔調(diào)零后測定各孔O.D值。

2S/N≥2.1為陽性；

3S/N＜2.1為陰性。

4陰性對照小于0.10時以0.10計。

3、肉眼可見藍色，但酶標儀測出O.D值小于0.21者，為可疑標本，應(yīng)擇日重測。對實驗結(jié)果可能產(chǎn)生影響的因素見“注意事項”內(nèi)容。

4、陰性對照O.D 值正常范圍應(yīng)＜0.21，陽性對照≥0.40以上實驗結(jié)果成立，否則實驗可能產(chǎn)生偏差，需重新試驗。

【參考值（參考范圍）】

正常健康人應(yīng)為陰性。即待測標本O.D 值比陰性對照O.D 值在2.1 倍以內(nèi)。

【檢驗方法的局限性】

1、本試劑盒檢測結(jié)果只作為輔助診斷，疾病的確診需要結(jié)合臨床癥狀/體征和其他檢查方法方可做出判斷。

2、本試劑盒不能確定抗LAM-IgG抗體的確切含量，屬于定性診斷。

【產(chǎn)品性能指標】

1、陽性符合率：檢測10份企業(yè)內(nèi)部陽性參考品，檢測結(jié)果全部為陽性。

2、陰性符合率：檢測15份企業(yè)內(nèi)部陰性參考品，檢測結(jié)果全部為陰性。

3、最低檢測限：檢測4 份企業(yè)最低檢出限參考品，L0，L1 應(yīng)為陽性，L2 可為陰性或陽性，L3為陰性。

4、精密性：檢測企業(yè)精密性參考品，重復(fù)10孔，批內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)小于10.0%。

【注意事項】

1、試劑盒僅供體外診斷用。

2、微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用，余者封存 置2-8℃2個月內(nèi)用完。

3、滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時保持瓶身垂直。

4、洗滌時每孔均須加滿，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。

5、試劑置2-8℃存放，不能凍結(jié)。

6、本試劑盒中陰、陽性對照雖不含人源性血清成分，但應(yīng)嚴格按常規(guī)作為污染物處理。